Skip to content
B-LCL-HROC10
Tissue
דם היקפי
Disease
קרצינומה
Synonyms
Bc HROC10

Documents

B-LCL-HROC10

Cell line · Product number 302143

B-LCL-HROC10 is an Epstein-Barr virus (EBV)-immortalized human B lymphoblastoid cell line established from B lymphocytes isolated from either tumor tissue...

US$800.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

B-LCL-HROC10 הוא קו תאים לימפוציטואידיים אנושיים שהונצחו על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) והוקמו מתאי B לימפוציטים שהופקו מרקמת גידול או מדם היקפי של חולה בוגר. התאים נוצרו על ידי זיהום ex vivo עם supernatant המכיל EBV שמקורו בקו תאים B95/8 marmoset בנוכחות cyclosporin A כדי לדכא את צמיחת תאי T ו-NK. לאחר מספר שבועות של תרבית, הושגה צמיחה לימפוציטית יציבה, שהובילה לאוכלוסיית תאי B מונוקלונליים או אוליגוקלונליים המתרבים ברציפות, המתאימה להרחבה ארוכת טווח במבחנה.

מבחינה אימונופנוטיפית, B-LCL-HROC10 מציג פרופיל של תאי B בוגרים ומופעלים, המאופיין בביטוי של CD19 ו-CD20, יחד עם רמות גבוהות של סמנים להפעלה ולהתבגרות כגון CD23 ו-CD80. ביטוי חזק של מולקולות MHC מסוג I ו-II מעיד על שמירה על יכולת הצגת אנטיגן. בהתאם לשכפול הבודד, ניתן להבחין בביטוי משתנה של סמנים הקשורים להבחנה כגון CD27, CD38 או CD138, המשקפים שלבים שונים בהתבגרות תאי B. התאים שליליים לסמני תאי T, מה שמאשר את הספציפיות של השושלת.

מבחינה תפקודית, B-LCL-HROC10 מפריש אימונוגלובולינים מסוג איזוטופ מוגדר (למשל, IgG, IgM או IgA), אשר נשארים יציבים במהלך תרבית ממושכת. הנוגדנים המופרשים ניתנים לאיסוף מתוצרי התרבית העליונים ושימוש ביישומים במורד הזרם, כולל בדיקות קשירת אנטיגן, מחקרים לזיהוי תאי גידול או זיהוי אנטיגנים הקשורים למחלות. כמודל של תאי B שהונצחו על ידי EBV, B-LCL-HROC10 מספק פלטפורמה חזקה במבחנה לחקר תגובות חיסוניות הומורליות, הפעלה והבחנה של תאי B ומנגנונים המתווכים על ידי נוגדנים בהקשר של אימונולוגיה של גידולים או תגובות חיסוניות מערכתיות.

Tissue
דם היקפי
Disease
קרצינומה
Synonyms
  • Bc HROC10

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
תאים עגולים
Cell type
לימפוציט B

04Identifiers

Citation
B-LCL-HROC10 (מספר קטלוגי Cytion 302143)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B4GP

05Expression and susceptibility

Surface antigens
CD19
Viruses
טרנספורמנט: EBV

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
Subculturing
הומוגניזציה עדינה של תמיסת התאים בבקבוק באמצעות פיפטה למעלה ולמטה, ולאחר מכן לקיחת דגימה מייצגת כדי לקבוע את צפיפות התאים למ"ל. דילול התמיסה כדי להשיג ריכוז תאים של 1 x 105 תאים/מ"ל עם מצע תרבית טרי, וחלוקת התמיסה המותאמת לבקבוקים חדשים להמשך התרבית.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
63 שנים
Ethnicity
קווקזי