B-LCL-HROC10
Cell line · Product number 302143
B-LCL-HROC10 is an Epstein-Barr virus (EBV)-immortalized human B lymphoblastoid cell line established from B lymphocytes isolated from either tumor tissue...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
B-LCL-HROC10 הוא קו תאים לימפוציטואידיים אנושיים שהונצחו על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) והוקמו מתאי B לימפוציטים שהופקו מרקמת גידול או מדם היקפי של חולה בוגר. התאים נוצרו על ידי זיהום ex vivo עם supernatant המכיל EBV שמקורו בקו תאים B95/8 marmoset בנוכחות cyclosporin A כדי לדכא את צמיחת תאי T ו-NK. לאחר מספר שבועות של תרבית, הושגה צמיחה לימפוציטית יציבה, שהובילה לאוכלוסיית תאי B מונוקלונליים או אוליגוקלונליים המתרבים ברציפות, המתאימה להרחבה ארוכת טווח במבחנה.
מבחינה אימונופנוטיפית, B-LCL-HROC10 מציג פרופיל של תאי B בוגרים ומופעלים, המאופיין בביטוי של CD19 ו-CD20, יחד עם רמות גבוהות של סמנים להפעלה ולהתבגרות כגון CD23 ו-CD80. ביטוי חזק של מולקולות MHC מסוג I ו-II מעיד על שמירה על יכולת הצגת אנטיגן. בהתאם לשכפול הבודד, ניתן להבחין בביטוי משתנה של סמנים הקשורים להבחנה כגון CD27, CD38 או CD138, המשקפים שלבים שונים בהתבגרות תאי B. התאים שליליים לסמני תאי T, מה שמאשר את הספציפיות של השושלת.
מבחינה תפקודית, B-LCL-HROC10 מפריש אימונוגלובולינים מסוג איזוטופ מוגדר (למשל, IgG, IgM או IgA), אשר נשארים יציבים במהלך תרבית ממושכת. הנוגדנים המופרשים ניתנים לאיסוף מתוצרי התרבית העליונים ושימוש ביישומים במורד הזרם, כולל בדיקות קשירת אנטיגן, מחקרים לזיהוי תאי גידול או זיהוי אנטיגנים הקשורים למחלות. כמודל של תאי B שהונצחו על ידי EBV, B-LCL-HROC10 מספק פלטפורמה חזקה במבחנה לחקר תגובות חיסוניות הומורליות, הפעלה והבחנה של תאי B ומנגנונים המתווכים על ידי נוגדנים בהקשר של אימונולוגיה של גידולים או תגובות חיסוניות מערכתיות.
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- קרצינומה
- Synonyms
- Bc HROC10
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- תאים עגולים
- Cell type
- לימפוציט B
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-HROC10 (מספר קטלוגי Cytion 302143)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B4GP
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- CD19
- Viruses
- טרנספורמנט: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
- Subculturing
- הומוגניזציה עדינה של תמיסת התאים בבקבוק באמצעות פיפטה למעלה ולמטה, ולאחר מכן לקיחת דגימה מייצגת כדי לקבוע את צפיפות התאים למ"ל. דילול התמיסה כדי להשיג ריכוז תאים של 1 x 105 תאים/מ"ל עם מצע תרבית טרי, וחלוקת התמיסה המותאמת לבקבוקים חדשים להמשך התרבית.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 63 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Third-party agreements apply
- Yes
.jpg)