Pereiti prie turinio
B-LCL-HROC10
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Karcinoma
Sinonimai
Bc HROC10

Dokumentai

B-LCL-HROC10

Cell line · Prekės numeris 302143

B-LCL-HROC10 – tai Epštejno-Barro viruso (EBV) įamžinta žmogaus B limfoblastoidų ląstelių linija, sukurta iš B limfocitų, izoliuotų iš naviko audinio...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Mažos atsargos
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

B-LCL-HROC10 yra Epstein-Barr viruso (EBV) nemirtinga žmogaus B limfoblastoidų ląstelių linija, sukurta iš B limfocitų, izoliuotų iš suaugusio paciento naviko audinio arba periferinio kraujo. Ląstelės buvo sukurtos ex vivo infekuojant EBV turinčiu supernatantu, gautu iš B95/8 marmosetų ląstelių linijos, esant ciklosporinui A, kuris slopina T ir NK ląstelių augimą. Po kelių savaičių kultivavimo buvo pasiektas stabilus limfoblastoidų augimas, dėl kurio susiformavo nuolat besidauginanti monokloninė arba oligokloninė B ląstelių populiacija, tinkama ilgalaikiam in vitro augimui.

Imunofenotipiškai B-LCL-HROC10 pasižymi brandžios ir aktyvuotos B ląstelės profiliu, kuriam būdingas CD19 ir CD20 ekspresija, kartu su aukštu aktyvacijos ir brendimo žymenų, tokių kaip CD23 ir CD80, lygiu. Stipri MHC I ir II klasės molekulių ekspresija rodo išsaugotą antigenų pateikimo gebą. Priklausomai nuo individualaus klono, gali būti stebimas kintamas diferenciacijos žymenų, tokių kaip CD27, CD38 arba CD138, ekspresija, atspindinti skirtingus B ląstelių brendimo etapus. Ląstelės yra neigiamos T ląstelių žymenims, patvirtindamos linijos specifiškumą.

Funkciniu požiūriu, B-LCL-HROC10 išskiria imunoglobuliną, turinčią apibrėžtą izotipą (pvz., IgG, IgM arba IgA), kuris išlieka stabilus ilgalaikio kultivavimo metu. Išskirti antikūnai gali būti surinkti iš kultūros supernatanto ir naudojami tolesniems taikymams, įskaitant antigenų rišimosi tyrimus, naviko ląstelių atpažinimo tyrimus arba su liga susijusių antigenų identifikavimą. Kaip EBV nemirtingas B ląstelių modelis, B-LCL-HROC10 suteikia patikimą in vitro platformą humoralinių imuninių atsakų, B ląstelių aktyvacijos ir diferenciacijos bei antikūnų mediatorių mechanizmų tyrimams naviko imunologijos arba sisteminių imuninių atsakų kontekste.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Karcinoma
Sinonimai
  • Bc HROC10

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Ląstelių tipas
B limfoblastas

04Identifikatoriai

Nuoroda
B-LCL-HROC10 (Cytion katalogo numeris 302143)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_B4GP

05Išraiška ir jautrumas

Paviršiaus antigenai
CD19
Virusai
Transformantas: EBV

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % termiškai inaktyvuoto FBS
Subkultūrinis auginimas
Švelniai homogenizuokite kolboje esantį ląstelių suspensiją, pipetuodami aukštyn ir žemyn, tada paimkite reprezentatyvią mėginį, kad nustatytumėte ląstelių tankį ml. Praskieskite suspensiją, kad pasiektumėte 1 x 105 ląstelių/ml koncentraciją šviežia kultūrinė terpė, ir padalinkite pakoreguotą suspensiją į naujas kolbas tolesniam auginimui.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
63 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių