 WAKO P1 10X01 070126_Overlay.jpg)
- Tissue
- תימוס
- Disease
- לימפומה של התימוס בעכבר
- Synonyms
- L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)
Documents
L5178Y TK+/- Clone (3.7.2C)
Cell line · Product number 305485
The L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C cell line is a mouse lymphoma model widely used for in vitro genotoxicity testing, particularly in the mouse lymphoma thymid...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C הוא מודל לימפומה בעכברים הנמצא בשימוש נרחב בבדיקות גנוטוקסיות במבחנה, במיוחד בבדיקת מוטציות בגן תיאמידין קינאז (TK) בלימפומה בעכברים (MLA). שיבוט זה נגזר מקו התאים ההורי L5178Y, שנוצר מלימפומה בבלוטת התימוס שהושרה על ידי מתילכולנטרן בעכברי DBA-2. תת-השיבוט 3.7.2C פותח במיוחד כדי להיות הטרוזיגוטי בלוקוס TK (TK+/−), מה שמאפשר בחירה של מוטנטים TK−/− באמצעות אירועי אובדן הטרוזיגוטיות.
תאי L5178Y TK+/− 3.7.2C מאופיינים בזמן הכפלה מהיר של האוכלוסייה (כ-8-11 שעות) ומספר כרומוזומים מודאלי יציב של 40. הם מציגים קריוטיפ מורכב הכולל מיזוגים רוברטסוניים וטרנסלוקציות ספציפיות. הגן p53 עבר מוטציה בתאים אלה, כאשר אלל אחד נושא מוטציה חסרת משמעות באקסון 4 והאלל השני נושא מוטציה משנה משמעות באקסון 5, מה שמביא לאובדן תפקודו התקין של p53. רקע גנטי זה משפר את השימושיות שלהם לחקר השפעות קלסטוגניות ומוטגניות.
- Tissue
- תימוס
- Disease
- לימפומה של התימוס בעכבר
- Synonyms
- L5178Y TK+/-3.7.2c
- TK+/- (clone 3.7.2C)
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי לימפוציט
- Cell type
- תא T
04Identifiers
- Citation
- L5178Y TK+/- שיבוט (3.7.2C) (מספר קטלוגי Cytion 305485)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_6665
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- יש להוסיף למדיום 10% FBS ו-0.1% Pluronic F-68
- Subculturing
- אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
- Seeding density
- 0,1–2*10⁶ תאים/מ"ל
- Fluid renewal
- פעמיים בשבוע
- Post-thaw recovery
- דילול מיידי לתוך 25 מ"ל של מצע גידול (סטנדרטי: 8 מ"ל)
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-95% (נפח/נפח) FBS + 5% (נפח/נפח) DMSO + 0.1% Pluronic F-68 כדי להבטיח חיוניות מספקת לאחר ההפשרה, או ב-CM-1 (מספר קטלוג Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי חילוף חומרים מותאמים, כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מההקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Breed / subspecies
- DBA/2
- Donor age
- 8 חודשים
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes