Skip to content
L5178Y TK+/- Clone (3.7.2C)
Tissue
ไทมัส
Disease
มะเร็งต่อมไทมัสในหนู
Synonyms
L5178Y TK+/-3.7.2c, TK+/- (clone 3.7.2C)

Documents

L5178Y TK+/- Clone (3.7.2C)

Cell line · Product number 305485

The L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C cell line is a mouse lymphoma model widely used for in vitro genotoxicity testing, particularly in the mouse lymphoma thymid...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ L5178Y TK+/− Clone 3.7.2C เป็นโมเดลลิมโฟมาของหนูที่ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการทดสอบความเป็นพิษต่อพันธุกรรมในหลอดทดลอง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทดสอบการกลายพันธุ์ของยีนไทมิดีนไคเนส (TK) ในลิมโฟมาของหนู (MLA) คลอนนี้ถูกพัฒนาจากเซลล์ไลน์ L5178Y ซึ่งเป็นเซลล์ต้นกำเนิดที่ถูกสร้างขึ้นจากลิมโฟมาของต่อมไทมัสที่เกิดจากสารเมทิลโคลันเธรนในหนู DBA-2 ซับโคลน 3.7.2C ได้รับการพัฒนาขึ้นเป็นพิเศษให้มีลักษณะเป็นเฮเทอโรไซกัสที่ตำแหน่ง TK (TK+/−) ซึ่งช่วยให้สามารถคัดเลือกมิวแทนต์ TK−/− ผ่านกระบวนการสูญเสียเฮเทอโรไซกัสได้

เซลล์ L5178Y TK+/− 3.7.2C มีลักษณะเด่นคือมีเวลาในการเพิ่มจำนวนประชากรอย่างรวดเร็ว (ประมาณ 8-11 ชั่วโมง) และมีจำนวนโครโมโซมแบบโมดอลที่คงที่คือ 40 ตัว พวกมันแสดงลักษณะของโครโมโซมที่ซับซ้อนรวมถึงการหลอมรวมแบบโรเบิร์ตสันและการแลกเปลี่ยนชิ้นส่วนเฉพาะ ยีน p53 มีการกลายพันธุ์ในเซลล์เหล่านี้ โดยอัลลีลหนึ่งมีการกลายพันธุ์แบบ nonsense ในเอ็กซอน 4 และอีกอัลลีลหนึ่งมีการกลายพันธุ์แบบ missense ในเอ็กซอน 5 ส่งผลให้สูญเสียการทำงานของ p53 ปกติ พื้นฐานทางพันธุกรรมนี้ช่วยเพิ่มประโยชน์ในการศึกษาผลกระทบที่ก่อให้เกิดการแตกหักของโครโมโซมและการกลายพันธุ์

Tissue
ไทมัส
Disease
มะเร็งต่อมไทมัสในหนู
Synonyms
  • L5178Y TK+/-3.7.2c
  • TK+/- (clone 3.7.2C)

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายลิมโฟบลาสต์
Cell type
เซลล์ที

04Identifiers

Citation
L5178Y TK+/- โคลน (3.7.2C) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305485)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_6665

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ Pluronic F-68 0.1%
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
0,1-2*10^6 เซลล์/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
เจือจางทันทีในอาหารเลี้ยงเชื้อ 25 มล. (มาตรฐาน: 8 มล.)
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
สำหรับสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 95% (v/v) FBS + 5% (v/v) DMSO + 0.1% Pluronic F-68 เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เหมาะสม หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
ดีบีเอ/2
Donor age
8 เดือน