B-LCL-HROC313

B-LCL-HROC313 هو خط خلايا ليمفوبلاستويدية بشرية خالدة بفيروس إبشتاين-بار (EBV) تم إنشاؤه من خلايا ليمفاوية بائية معزولة من نسيج ورم أو دم محيطي لمريض بالغ. تم إنتاج الخلايا عن طريق العدوى خارج الجسم الحي بواسطة سائل فوقي يحتوي على فيروس إبشتاين-بار مشتق من خط خلايا المرموسيت B95/8 في وجود سيكلوسبورين A لقمع نمو الخلايا التائية والخلايا القاتلة الطبيعية. بعد عدة أسابيع من الاستزراع، تم تحقيق نمو مستقر للخلايا اللمفاوية، مما أدى إلى تكاثر مستمر لخلايا B أحادية النسيلة أو قليلة النسيلة مناسبة للتوسع طويل الأمد في المختبر.

من الناحية المناعية، يُظهر B-LCL-HROC313 ملامح خلايا B ناضجة ومُنشطة تتميز بتعبير CD19 و CD20، إلى جانب مستويات عالية من علامات التنشيط والنضج مثل CD23 و CD80. يشير التعبير القوي لجزيئات MHC من الفئة I والفئة II إلى الحفاظ على القدرة على تقديم المستضدات. اعتمادًا على النسخة الفردية، يمكن ملاحظة تعبير متغير لعلامات التمايز مثل CD27 أو CD38 أو CD138، مما يعكس مراحل مختلفة من نضج الخلايا البائية. الخلايا سلبية بالنسبة لعلامات الخلايا التائية، مما يؤكد خصوصية السلالة.

من الناحية الوظيفية، يفرز B-LCL-HROC313 غلوبولين مناعي من نوع محدد (مثل IgG أو IgM أو IgA)، والذي يظل مستقرًا أثناء الاستزراع المطول. يمكن جمع الأجسام المضادة المفرزة من طبقات السائل الفوقي للثقافة واستخدامها في تطبيقات لاحقة، بما في ذلك اختبارات ربط المستضدات، ودراسات التعرف على الخلايا السرطانية، أو تحديد المستضدات المرتبطة بالمرض. كنموذج للخلايا البائية المخلدة بفيروس إبشتاين بار (EBV)، يوفر B-LCL-HROC313 منصة قوية في المختبر لدراسة الاستجابات المناعية الخلطية، وتنشيط الخلايا البائية وتمايزها، والآليات التي تتوسطها الأجسام المضادة في سياق علم المناعة السرطانية أو الاستجابات المناعية الجهازية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان