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Sub-14
Enfermedad
carcinoma cervical

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Sub-14

Cell line · Número de producto 305509

La línea celular U14 es un modelo murino de carcinoma escamoso cervical que se estableció originalmente mediante el tratamiento del cuello uterino de ratones con 20-metil...

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Personalización / Recomendaciones

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01Información general

Descripción

La línea celular U14 es un modelo murino de carcinoma escamoso cervical que se estableció originalmente mediante el tratamiento del cuello uterino de ratones con 20-metilcolantreno. Las células U14 se han utilizado ampliamente en la investigación sobre el cáncer, especialmente para estudiar la invasión tumoral, la metástasis y la selección de fármacos. Cuando se implantan en ratones, muestran un alto potencial metastásico, con tasas de metástasis linfáticas y pulmonares del 95 % y el 80 %, respectivamente. In vitro, las células presentan características epiteliales, incluida una tinción positiva para citoqueratina, y muestran una morfología poligonal y fusiforme.

Enfermedad
carcinoma cervical

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
Sub 14 (número de catálogo de Cytion 305509)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_9U56

04Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Densidad de siembra
2-4*10⁴/cm²
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

06Donante

Raza / subespecie
Kumming