EMEM (MEM Eagle), sisaldab: 2 mM L-glutamiini, sisaldab: 2,2 g/l NaHCO₃, sisaldab: EBSS

Eagle’i minimaalne essentsiaalne kasvukeskkond (EMEM) on üks laialdasemalt kasutatavaid baaskeskkondi mitmesuguste imetajate rakkude, eriti adhesiivsete rakuliinide kasvatamiseks. Algselt Harry Eagle’i poolt välja töötatud klassikaline koostis sisaldab olulisi aminohappeid, vitamiine ja anorgaanilisi sooli, mis on vajalikud nii esmaste rakkude kui ka väljakujunenud rakuliinide kasvu toetamiseks standardsetes kultiveerimistingimustes.

Seda kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud vedelat koostist on täiendatud Earle’i tasakaalustatud soolalahusega (EBSS), 2 mM L-glutamiini, D-glükoosi (1,0 g/l) ja 2,2 g/l naatriumvesinikkarbonaadiga (NaHCO₃), mistõttu sobib see kasutamiseks CO₂-kontrollitud inkubaatori keskkonnas (tavaliselt 5 % CO₂). Koostisesse kuuluv fenoolpunane toimib pH-indikaatorina, võimaldades rakukultuuri ajal keskkonna seisundi mugavat visuaalset jälgimist.

Peamised omadused

• Klassikaline Eagle’i MEM-koostis Earle’i tasakaalustatud soolalahusega (EBSS)
• Sisaldab 2 mM L-glutamiini – valmis koheseks kasutamiseks
• 2,2 g/l naatriumvesinikkarbonaati – puhverdatud 5 % CO₂ inkubeerimiseks
• Peamise süsinikuallikana D-glükoos (1,0 g/l)
• pH-indikaatorina fenoolpunane
• Ilma HEPES-ita ja ilma naatriumpüruvaadita
• Steriilselt filtreeritud vedel kasvukeskkond, valmis kasutamiseks
• pH 7,0–7,6

Tüüpilised rakendused

EMEM sobib mitmesuguste imetajate rakuliinide kasvatamiseks, sealhulgas HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 ja paljude primaarrakkude kasvatamiseks. Tüüpilised rakendused hõlmavad:

• Adherentsete rakuliinide rutiinne hooldus ja paljundamine
• Viiruste paljundamine ja vaktsiinide tootmise töövood
• Tsütotoksilisuse ja biotestide rakendused
• Transfektsiooni- ja valgu ekspressiooni uuringud
• Rakubioloogia ja molekulaarbioloogia alusuuringud

Optimaalse rakkude kasvu tagamiseks lisatakse EMEM-ile tavaliselt 5–10 % veise loote seerumit (FBS) ning sõltuvalt rakuliinist ka mitteolulisi aminohappeid (NEAA) ja antibiootikume, nagu penitsilliin/streptomütsiin.

Käsitsemine ja säilitamine

Hoida avamata pudelit temperatuuril +2 °C kuni +8 °C, valguse eest kaitstult. Pärast avamist kasutada aseptilistes tingimustes. Lahuses olev L-glutamiin laguneb järk-järgult – parima tulemuse saavutamiseks soovitame keskkonda kasutada 4 nädala jooksul pärast avamist või pikema säilitamise korral lisada enne kasutamist värsket L-glutamiini. Enne rakkudele lisamist laske keskkonnal soojeneda 37 °C-ni.

Kvaliteet

Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga partii steriilsust, pH-väärtust, osmolalisust ja endotoksiinitaset kontrollitakse, et tagada ühtlane toimivus rakukultuuri rakendustes.

Toote spetsifikatsioonid

Spetsifikatsioon	Üksikasjad
Tootetüüp	MEM
Tootekategooria	Rakukultuuri kasvukeskkonnad
Vorm	Vedelik
Steriilne	Jah
Maht	500 ml
L-glutamiin	L-glutamiiniga (2 mM)
Glükoos	Sisaldab glükoosi (1,0 g/l)
NaHCO3	NaHCO₃-ga (2,2 g/l)
HEPES	Ilma HEPES-ita
Na-püruvaat	Ilma naatriumpüruvaadita
Fenoolpunane	Fenoolpunaga
Soolalahus	Earle’i tasakaalustatud soolalahus (EBSS)
pH	7,0 – 7,6
Endotoksiinisisaldus	Ei ole määratud
Säilitamine	+2 °C kuni +8 °C

Koostis (koostis ühe liitri kohta)