Mine otse sisu juurde
NFS-60
Kude
Veri
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
M-NFS-60, NFS 60, NFS60

Dokumendid

NFS-60

Cell line · Toote number 400301

NFS-60 is a murine myeloblastic cell line established from leukemic cells obtained after infection of (NFS x DBA/2) F1 adult mice with Cas Br-M murine leukem...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus
NFS-60 on hiirte müeloblastiline rakuliin, mis on loodud leukeemiarakkudest, mis on saadud pärast (NFS x DBA/2) F1 täiskasvanud hiirte nakatamist Cas Br-M hiirte leukeemiaviirusega. NFS-60 rakkude kasv ja elujõulisuse säilitamine in vitro sõltub IL3-st. Neid rakke kasutatakse hiirte ja inimese G-CSF-i analüüsimiseks. See kahepotentsiaalne hiirte vereloome rakuliin reageerib IL-3-le, GM-CSF-le, G-CSF-le ja erütropoetiinile.
Kude
Veri
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
  • M-NFS-60
  • NFS 60
  • NFS60

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Lümfoblastid

04Tunnused

Viide
NFS-60 (Cytioni katalooginumber 400301)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_3543

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga, 1 ng/ml IL-3
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
Alustage kultuuride kasvatamist 5 x 104 eluvõimelise raku/ml kontsentratsiooniga.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
NFS x DBA/2