Siirry sisältöön
Y-79
Kudos
Retina
Sairaus
Retinoblastooma
Synonyymit
Y79, GM01232, GM01232E

Asiakirjat

Y-79

Cell line · Tuotenumero 300382

The Y79 line was isolated by T.W. Reid and associates in January 1971 by explant culture of a primary tumor from the right eye obtained immediately after enu...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
T.W. Reid ja kumppanit eristivät Y79-linjan tammikuussa 1971 eksplantaatioviljelyllä primaarikasvaimesta, joka saatiin oikeasta silmästä välittömästi enukleaation jälkeen. Luovuttajalla oli äidin suvussa vahva retinoblastooma. Ultrastrukturaaliset piirteet, mukaan lukien ydinkalvon poimuuntumat, kolminkertaiset kalvorakenteet, mikrotubulukset, suuret päällystetyt vesikkelit, sentriolit, tyvitumakkeet ja rengasmaiset lamellit, olivat tiettävästi samanlaisia kuin alkuperäisessä kasvaimessa.
Kudos
Retina
Sairaus
Retinoblastooma
Synonyymit
  • Y79
  • GM01232
  • GM01232E

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Monisoluiset klusterit
Karyotyyppi
Hypertriploidinen, poikkeavuuksia, kuten dicentrisiä, taukoja, pulverisaatioita ja minuutteja

04Tunnisteet

Lähdeviite
Y-79 (Cytionin luettelonumero 300382)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1893

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
PGM1, 1, G6PD, B, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.1373
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Kylvötiheys
1 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
2,5 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen