29 Oct 2026
SK-N-SH ir neuronų diferenciacijos tyrimai
SK-N-SH ir neuronų diferenciacijos tyrimai
SK-N-SH ląstelių linija yra vienas iš plačiausiai naudojamų modelių neuronų diferenciacijos tyrimams, leidžiantis mokslininkams gauti vertingų įžvalgų apie neuronų vystymąsi, funkciją ir reakciją į vaistus. "Cytion" tiekia autentiškas SK-N-SH ląsteles, kurios nuolat teikia patikimus rezultatus neurobiologiniams tyrimams.
| Pagrindinės išvados | |
|---|---|
| Kilmė | Žmogaus neuroblastoma, gauta iš kaulų čiulpų metastazių |
| Diferenciacijos agentas | Daugiausia retinoinė rūgštis (RA); taip pat reaguoja į BDNF ir NGF |
| Žymenys | Po diferenciacijos išreiškia βIII-tubuliną, MAP2 ir NeuN |
| Taikymo sritys | Neurodegeneracinių ligų modeliavimas, neurotoksiškumo tyrimai, vaistų atranka |
| Privalumai | Stabilus augimas, didelis atkuriamumas, gerai apibūdinta reakcija |
SK-N-SH ląstelių linijos kilmė
SK-N-SH ląstelių linija buvo sukurta 1973 m. iš ketverių metų neuroblastoma sergančios pacientės kaulų čiulpų metastazių. Šiai iš žmogaus kilusiai ląstelių linijai būdinga epitelio morfologija ir ji yra mišri populiacija, kurią sudaro neuroblastinės (N tipo) ir prie substrato prisitvirtinusios (S tipo) ląstelės. Šis heterogeniškumas labai tiksliai atkartoja ląstelių įvairovę, pastebėtą pirminėse neuroblastomose, todėl tai yra išskirtinis modelis neuronų diferenciacijos procesams tirti. "Cytion" palaiko šias ląsteles optimaliomis sąlygomis, naudodami RPMI 1640 terpę, papildytą 10 % FBS, kad būtų užtikrintas jų unikalių savybių ir diferenciacijos potencialo išsaugojimas. Tyrėjai, norėdami atlikti neuronų savybių lyginamąsias analizes, SK-N-SH tyrimus dažnai derina su kitomis neuroblastomos linijomis, pavyzdžiui, SH-SY5Y ląstelėmis.
SK-N-SH diferencijavimo medžiagos
SK-N-SH ląstelių liniją galima veiksmingai diferencijuoti į į neuronus panašias ląsteles naudojant kelis junginius, iš kurių plačiausiai naudojama ir labiausiai patikima medžiaga yra retinoinė rūgštis (RA). SK-N-SH ląsteles 5-7 dienas veikiant 10-20 μM RA, SK-N-SH ląstelėse išsivysto plačios neuritų ataugos ir padidėja neuronų žymenų kiekis. Be RA, šios ląstelės taip pat pasižymi stipriu diferenciacijos atsaku į smegenų kilmės neurotrofinį veiksnį (BDNF) ir nervų augimo veiksnį (NGF), paprastai esant 50-100 ng/ml koncentracijai. Siekiant optimalių rezultatų, rekomenduojame šiuos diferenciacijos agentus naudoti RPMI 1640 terpėje su sumažintu serumo kiekiu (1-2 % FBS). Diferenciacijos procesą galima stebėti morfologiškai ir patikrinti naudojantis mūsų paslauga " Ląstelių linijų autentiškumo nustatymas - žmogus", kad būtų užtikrinti nuoseklūs eksperimentų rezultatai.
Neuronų žymenys diferencijuotose SK-N-SH ląstelėse
Po sėkmingos diferenciacijos SK-N-SH ląstelės pasižymi dideliu pagrindinių neuronų žymenų padidėjimu, kuris patvirtina, kad jos pereina prie brandaus neuronų fenotipo. Labiausiai šios ląstelės išreiškia βIII-tubuliną - neuronams būdingą citoskeleto baltymą, kuris koncentruojasi ilgėjančiuose neurituose ir yra ankstyvas neuronų įsitvirtinimo indikatorius. Be to, diferencijuotos SK-N-SH ląstelės pasižymi padidėjusia su mikrotubuliais susijusio baltymo 2 (MAP2), kuris yra labai svarbus dendritų vystymuisi ir stabilizavimui, ir neuronų branduolių baltymo (NeuN), brandžių neuronų žymens, daugiausia aptinkamo postmitotiniuose neuronuose, raiška. Šiuos baltyminius žymenis galima aptikti naudojant imunofluorescencijos metodus, o jų raiškos lygis palaipsniui didėja per visą diferenciacijos laikotarpį (paprastai didžiausias būna praėjus 7-10 dienų po indukcijos). Mokslininkams, tiriantiems neuronų diferenciacijos mechanizmus, rekomenduojame SK-N-SH tyrimus papildyti stebėjimais kituose neuronų modeliuose, pavyzdžiui, SH-SY5Y ląstelėse arba PC-12 ląstelėse, kad būtų nustatyti nuoseklūs neuronų žymenų raiškos modeliai.