Pāriet uz saturu
2427T šūnas
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu plakanšūnu karcinoma

Dokumenti

2427T šūnas

Cell line · Preces numurs 300167

2427T, kas iegūts no 64 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes primārā audzēja, kurai diagnosticēta plaušu plakanšūnu karcinoma, nodrošina vērtīgu in vitro...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

2427T, kas iegūts no 64 gadus vecas kaukāzietes pacientes, kurai diagnosticēta plaušu plakanšūnu karcinoma, primārā audzēja, ir vērtīgs in vitro modelis, kas ataino sākotnējā audzēja audu morfoloģiskās īpašības. 2427T šūnām, kurām raksturīga raksturīga maza, apaļa forma un tieksme apvienoties kopās, piemīt galvenās morfoloģiskās pazīmes, kas raksturīgas plakanšūnu karcinomai (SCC).

Raksturīga 2427T šūnu līnijas iezīme ir citokeratīna 5/6 (CK5/6) ekspresija, kas norāda uz SCC izcelsmi. Neviendabīgā CK5/6 ekspresija norāda uz dažādu šūnu subpopulāciju klātbūtni 2427T kultūrā, radot iespēju turpmāk pētīt intratumorālo heterogenitāti.

2427T imūnfenotipēšana atklāja tās unikālo profilu, tostarp ar adenokarcinomu saistītā marķiera CK7, hemato-endotēlija progenitoru marķiera CD34 un leikocītu marķiera CD45 trūkumu, kas pastiprina tās klasifikāciju plakanas līnijas ietvaros. Interesanti, ka, lai gan šūnu līnija kopumā uzrāda negatīvu neiroendokrīno marķieru, piemēram, CD56, sinaptofizīna (SYP), neironiem specifiskās enolāzes (NSE) un hromogranīna A (CHGA) klātbūtni, SYP ekspresija šūnu apakšgrupā norāda uz zināmu neiroendokrīno marķieru heterogenitāti.

Būtiski, ka 2427T šūnu līnijā nav EGF-R vai k-ras mutāciju, kas to atšķir no citiem modeļiem un uzsver tās potenciālu kā jaunu resursu, lai izpētītu plakanšūnu plaušu vēža (NSCLC) bioloģiju un terapeitisko ievainojamību. Tas, ka 2427T nav izplatītu onkogēnu mutāciju, ļauj to uzskatīt par nenovērtējamu instrumentu pētījumiem, kuru mērķis ir atklāt plakanšūnu karcinomas patoģenēzes un progresēšanas pamatmehānismus.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu plakanšūnu karcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Ļoti audzēja nude peles.

04Identifikatori

Atsauce
2427T (Cytion kataloga numurs 300167)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Sinaptofizīns (SYP)
Antigēna ekspresija
Daļēja CK5/6 ekspresija

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
64 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis