Pāriet uz saturu
CCD-1095Sk
Audums
Āda
Slimība
Duktālā karcinoma
Sinonīmi
CCD1095Sk

Dokumenti

CCD-1095Sk

Cell line · Preces numurs 300642

CCD-1095Sk is a fibroblast cell line derived from the skin of a human male. It was established from a biopsy of uninvolved skin taken from a patient who h...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CCD-1095Sk ir fibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka ādas. Tā tika izveidota no neskartas ādas biopsijas, kas tika ņemta no pacienta, kuram bija plakanšūnu karcinoma. Šo šūnu līniju galvenokārt izmanto pētījumos, kuros pēta mijiedarbību starp ādas šūnām un vēža šūnām, jo īpaši to, kā audzēja mikrovidē esošās neraksturīgās šūnas var ietekmēt audzēja augšanu un progresēšanu. Tāpēc CCD-1095Sk šūnu līnija ir vērtīga vēža pētījumos, jo īpaši, lai izprastu ādas vēža stromālos aspektus.

CCD-1095Sk šūnām piemīt fibroblastu morfoloģija, ko raksturo vārpstas formas, iegarena forma, kas raksturīga saistaudu šūnām, kuras ražo ekstracelulārā matriksa komponentus, kas būtiski audu atjaunošanai un strukturālajai integritātei. Šīs šūnas ir adherentas, aug monoslāņos un ir pazīstamas ar savu izturību dažādos in vitro eksperimentālos apstākļos. Tās izmanto, lai modelētu fibroblastu uzvedību normālā ādā un pētītu fibroblastu aktivitātes izmaiņas vēža apstākļos, kas var ietvert augšanas faktoru, citokīnu un matriksa metaloproteināžu sekrēciju. Tādējādi tie ir nenovērtējams līdzeklis farmakoloģiskiem pētījumiem un terapeitisku stratēģiju izstrādei, kas vērstas uz audzēja vidi.

Audums
Āda
Slimība
Duktālā karcinoma
Pieteikumi
3D šūnu kultūras
Sinonīmi
  • CCD1095Sk

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
CCD-1095Sk (Cytion kataloga numurs 300642)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2344

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
37 gadi