Przejdź do treści
HPAF-II
Chusteczka
Trzustka
Choroba
Gruczolakorak przewodowy trzustki
Miejsce przerzutów
Wodobrzusze
Synonimy
HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18

Dokumenty

HPAF-II

Cell line · Numer produktu 305088

HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...

€650.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

HPAF-II to ludzka linia komórek gruczolakoraka trzustki pochodząca od dorosłego pacjenta. Ta linia komórkowa jest powszechnie stosowana w badaniach nad rakiem ze względu na jej znaczenie w badaniach nad rakiem trzustki, wysoce agresywnym i śmiertelnym nowotworem złośliwym. Komórki HPAF-II wykazują morfologię nabłonkową i są znane ze swojej zdolności do tworzenia guzów po ksenoprzeszczepieniu do myszy z obniżoną odpornością, co czyni je cennym modelem do badań in vivo nad wzrostem guza, przerzutami i odpowiedzią na interwencje terapeutyczne. Naukowcy często wykorzystują komórki HPAF-II do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw progresji raka trzustki, w tym zmian genetycznych i epigenetycznych, szlaków transdukcji sygnału i interakcji z mikrośrodowiskiem guza.

Komórki HPAF-II charakteryzują się specyficznymi mutacjami i zmianami genetycznymi, które są często obserwowane w gruczolakoraku trzustki. Obejmują one mutacje w genie KRAS, który odgrywa kluczową rolę w sygnalizacji komórkowej i proliferacji, oraz zmiany w genach supresorowych nowotworu, takich jak TP53 i CDKN2A. Linia komórkowa wykazuje również wysoki poziom produkcji mucyny, co przyczynia się do agresywnego charakteru guzów trzustki. Badania wykorzystujące komórki HPAF-II dostarczyły znaczącego wglądu w biologię raka trzustki i ułatwiły rozwój potencjalnych strategii terapeutycznych ukierunkowanych na kluczowe szlaki molekularne zaangażowane w tę chorobę.

Chusteczka
Trzustka
Choroba
Gruczolakorak przewodowy trzustki
Miejsce przerzutów
Wodobrzusze
Synonimy
  • HPAF II
  • HPAFII
  • HPAF-2
  • HPAF2
  • HPAF/CD18
  • CD18/HPAF
  • HPAF-II/CD18
  • CD-18
  • CD18
  • CD 18

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Czas podwojenia
26 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HPAF-II (numer katalogowy Cytion 305088)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0313

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
44 lata
Pochodzenie etniczne
Europejski