Skip to content
เซลล์ GCT
Tissue
ปอด
Disease
ซาร์โคมาชนิดไม่เฉพาะเจาะจงและรูปร่างหลากหลาย
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
Giant Cell Tumor

Documents

เซลล์ GCT

Cell line · Product number 300155

The GCT cell line, originating from a giant cell tumor (GCT) isolated from the lung of an adult male patient with fibrous histiocytoma, is renowned for it...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ GCT ซึ่งมีต้นกำเนิดจากเนื้องอกเซลล์ยักษ์ (GCT) ที่แยกได้จากปอดของผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่มีภาวะเนื้อเยื่อเกี่ยวพันผิดปกติ เป็นที่รู้จักกันดีในด้านกิจกรรมทางชีวภาพที่แข็งแกร่งในวงการวิจัยทางการแพทย์สายการผลิตนี้สร้างกิจกรรมกระตุ้นการเจริญเติบโตของโคโลนี (Colony Stimulating Activity: CSA) สำหรับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดขาวชนิดแกรนูโลไซต์ และกิจกรรมคล้ายอีริโทรโพเอติน (Erythropoietin-like Erythroid Activity: EEA) สำหรับเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดง ทำให้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาการควบคุมและพัฒนาการของเซลล์เม็ดเลือดเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดขาวชนิดแกรนูโลไซต์และเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดง ซึ่งเป็นเป้าหมายของผลิตภัณฑ์จากเซลล์ไลน์ GCT มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจกระบวนการต่าง ๆ เช่น การทำงานของนิวโทรฟิลในระบบภูมิคุ้มกันและการสร้างเม็ดเลือดแดงตามลำดับ

นอกจากนี้ สารอาหารที่ถูกปรับสภาพโดยเซลล์ไลน์นี้ยังเป็นแหล่งสำคัญของพรอสตาแกลนดิน E และพลาสมินเจนแอคติเวเตอร์ สารเหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการตอบสนองต่อการอักเสบและกระบวนการสลายลิ่มเลือดตามลำดับพรอสตาแกลนดิน อี มีความจำเป็นต่อการปรับการอักเสบและการรักษาสมดุลทางสรีรวิทยา ขณะที่พลาสมินเจนแอคติเวเตอร์มีส่วนช่วยในการสลายลิ่มเลือด การมีอยู่ของปัจจัยเหล่านี้ในอาหารเลี้ยงเซลล์ของเซลล์ไลน์ GCT ชี้ให้เห็นถึงศักยภาพในการพัฒนาวิธีการรักษาที่มุ่งเน้นไปที่โรคหัวใจและหลอดเลือดและภาวะที่เกี่ยวข้องกับการเกิดลิ่มเลือดและการอักเสบที่มากเกินไป

Tissue
ปอด
Disease
ซาร์โคมาชนิดไม่เฉพาะเจาะจงและรูปร่างหลากหลาย
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • Giant Cell Tumor

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
GCT (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300155)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1229

04Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 2 x 104 เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

06Donor

Donor age
29 ปี