B-LCL-HROC102
Cell line · Product number 302001
B-LCL-HROC102 is an Epstein-Barr virus (EBV)-immortalized human B lymphoblastoid cell line established from B lymphocytes isolated from either tumor tissu...
Customization / Recommendations
- B-LCL-HROC102Cell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
B-LCL-HROC102 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากลิมโฟไซต์บีที่แยกได้จากเนื้อเยื่อเนื้องอกหรือเลือดส่วนปลายของผู้ป่วยผู้ใหญ่ เซลล์ถูกสร้างขึ้นโดยการติดเชื้อ ex vivo ด้วยซูเปอร์นาทานต์ที่มีเชื้อ EBV จากสายเซลล์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซตในสภาวะที่มีไซโคลสปอริน A เพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ T และ NK หลังจากเพาะเลี้ยงเป็นเวลาหลายสัปดาห์ การเจริญเติบโตของลิมโฟบลาสโตอยด์ที่คงตัวก็เกิดขึ้น ส่งผลให้เกิดประชากรเซลล์ B แบบโคลนเดียวหรือโคลนหลายโคลนที่เพิ่มจำนวนอย่างต่อเนื่อง ซึ่งเหมาะสำหรับการขยายในหลอดทดลองระยะยาว
ในเชิงภูมิคุ้มกันฟีโนไทป์ B-LCL-HROC102 แสดงลักษณะของเซลล์บีที่เจริญเต็มที่และถูกกระตุ้น โดยมีลักษณะเด่นคือการแสดงออกของ CD19 และ CD20 ร่วมกับระดับสูงของตัวบ่งชี้การกระตุ้นและการเจริญเต็มที่ เช่น CD23 และ CD80 การแสดงออกอย่างเข้มข้นของโมเลกุล MHC คลาส I และคลาส II บ่งชี้ถึงความสามารถในการนำเสนอแอนติเจนที่ยังคงอยู่ ขึ้นอยู่กับโคลนแต่ละตัว อาจพบการแสดงออกของตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลง เช่น CD27, CD38 หรือ CD138 ในระดับที่แตกต่างกัน ซึ่งสะท้อนถึงระยะการพัฒนาของเซลล์บีที่แตกต่างกัน เซลล์เหล่านี้ไม่มีตัวบ่งชี้ของเซลล์ที ซึ่งยืนยันความจำเพาะของสายพันธุ์
ในเชิงหน้าที่ B-LCL-HROC102 ปล่อยอิมมูโนโกลบูลินที่มีไอโซไทป์ที่กำหนดไว้ (เช่น IgG, IgM หรือ IgA) ซึ่งยังคงเสถียรในระหว่างการเพาะเลี้ยงเป็นเวลานาน แอนติบอดีที่ถูกหลั่งออกมาสามารถเก็บได้จากส่วนใสของวัฒนธรรมและนำไปใช้ในกระบวนการต่อไป เช่น การทดสอบการจับแอนติเจน การศึกษาการจำแนกเซลล์มะเร็ง หรือการระบุแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับโรค ในฐานะที่เป็นโมเดลเซลล์บีที่คงสภาพด้วย EBV, B-LCL-HROC102 ให้แพลตฟอร์มที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของเหลว การกระตุ้นและการแยกแยะเซลล์บี และกลไกที่เกิดจากแอนติบอดีในบริบทของภูมิคุ้มกันมะเร็งหรือการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันทั่วร่างกาย
- Tissue
- เลือดส่วนปลาย
- Disease
- มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
- Synonyms
- Bc HROC102
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- เซลล์กลม
- Cell type
- ลิมโฟบลาสต์ชนิดบี
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-HROC102 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302001)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A7UM
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- ซีดี19
- Viruses
- ทรานส์ฟอร์แมนท์: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
- Subculturing
- ค่อยๆ ปรับให้เซลล์ในขวดมีความสม่ำเสมอโดยการดูดและปล่อยขึ้นลง จากนั้นนำตัวอย่างที่เป็นตัวแทนมาเพื่อกำหนดความหนาแน่นของเซลล์ต่อมิลลิลิตร เจือจางสารแขวนลอยให้ได้ความเข้มข้นของเซลล์ 1 x 105 เซลล์/มิลลิลิตร ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ และแบ่งสารแขวนลอยที่ปรับแล้วใส่ขวดใหม่สำหรับการเพาะเลี้ยงต่อไป
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- อายุไม่ระบุ
- Ethnicity
- คอเคเชียน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Third-party agreements apply
- Yes
.jpg)