B-LCL-HROC46

B-LCL-HROC46 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากเซลล์ลิมโฟไซต์บีที่แยกได้จากเนื้อเยื่อเนื้องอกหรือเลือดส่วนปลายของผู้ป่วยผู้ใหญ่ เซลล์ถูกสร้างขึ้นโดยการติดเชื้อ ex vivo ด้วยซูเปอร์นาทานต์ที่มีเชื้อ EBV จากสายเซลล์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซตในสภาวะที่มีไซโคลสปอริน A เพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ T และ NK หลังจากเพาะเลี้ยงเป็นเวลาหลายสัปดาห์ ได้มีการเจริญเติบโตของลิมโฟบลาสโตอยด์ที่คงที่ ส่งผลให้เกิดประชากรเซลล์ B แบบโคลนเดียวหรือโคลนหลายโคลนที่เพิ่มจำนวนอย่างต่อเนื่อง ซึ่งเหมาะสมสำหรับการขยายตัวในหลอดทดลองระยะยาว

ในเชิงภูมิคุ้มกันฟีโนไทป์ B-LCL-HROC46 แสดงลักษณะของเซลล์บีที่เจริญเต็มที่และถูกกระตุ้น โดยมีลักษณะเด่นคือการแสดงออกของ CD19 และ CD20 ร่วมกับระดับสูงของตัวบ่งชี้การกระตุ้นและการเจริญเต็มที่ เช่น CD23 และ CD80 การแสดงออกอย่างเข้มข้นของโมเลกุล MHC คลาส I และคลาส II บ่งชี้ถึงความสามารถในการนำเสนอแอนติเจนที่ยังคงอยู่ ขึ้นอยู่กับโคลนแต่ละตัว อาจพบการแสดงออกของตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงที่แตกต่างกัน เช่น CD27, CD38 หรือ CD138 ซึ่งสะท้อนถึงระยะต่างๆ ของการเจริญเติบโตของเซลล์บี เซลล์เหล่านี้ไม่มีตัวบ่งชี้ของเซลล์ที ซึ่งยืนยันถึงความจำเพาะของสายพันธุ์

ในเชิงหน้าที่ B-LCL-HROC46 ปล่อยอิมมูโนโกลบูลินที่มีไอโซไทป์ที่กำหนดไว้ (เช่น IgG, IgM หรือ IgA) ซึ่งยังคงเสถียรในระหว่างการเพาะเลี้ยงเป็นเวลานาน แอนติบอดีที่ถูกหลั่งออกมาสามารถเก็บได้จากซุปเปอร์นาแทนท์ของวัฒนธรรมและนำไปใช้ในกระบวนการต่อไปได้ เช่น การทดสอบการจับแอนติเจน การศึกษาการจำแนกเซลล์มะเร็ง หรือการระบุแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับโรค ในฐานะที่เป็นแบบจำลองเซลล์บีที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วย EBV, B-LCL-HROC46 ให้แพลตฟอร์มในหลอดทดลองที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบฮูโมรัล การกระตุ้นและการแยกแยะของเซลล์บี และกลไกที่เกิดจากแอนติบอดีในบริบทของภูมิคุ้มกันของมะเร็งหรือการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบระบบ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.