Skip to content
C643
Tissue
ต่อมไทรอยด์ชนิดอะนาพลาสติก
Disease
มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก
Synonyms
C 643, C-643, c643

Documents

C643

Cell line · Product number 300298

The cell line C643 was established from a fine-needle biopsy of an anaplastic thyroid carcinoma of a 76-year-old man by Mark et al. in 1987. The patient d...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ C643 ถูกสร้างขึ้นจากการตัดชิ้นเนื้อด้วยเข็มขนาดเล็กของมะเร็งไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติกจากชายอายุ 76 ปี โดย Mark และคณะ ในปี 1987 ผู้ป่วยเสียชีวิตภายใน 5 เดือนหลังการวินิจฉัย การตรวจพบ mRNA ของไทรอกซินยืนยันว่าเซลล์ไลน์นี้มีต้นกำเนิดจากเยื่อบุผิวของต่อมไทรอยด์ เซลล์ C643 กลายเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยมะเร็งไทรอยด์

เซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อมะเร็งต่อมไทรอยด์ของมนุษย์ และเป็นตัวแทนของมะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแพร่กระจาย (PTC, FTC, และ ATC) โครงสร้างทางพันธุกรรมของพวกมันสะท้อนให้เห็นการกลายพันธุ์ที่พบได้บ่อยในมะเร็งต่อมไทรอยด์ เช่น การเปลี่ยนแปลงในยีน BRAF, RAS, และ PI3K ซึ่งกระตุ้นเส้นทางสัญญาณที่สำคัญ

สิ่งนี้ทำให้เซลล์ C643 เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับกลไกที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาและการลุกลามของมะเร็งต่อมไทรอยด์ นอกจากนี้ เซลล์ C643 ยังเป็นทรัพยากรที่สำคัญสำหรับการทดสอบการรักษาแบบมุ่งเป้าที่มีศักยภาพอีกด้วย

การรวมเซลล์เหล่านี้ในการศึกษาในระยะก่อนคลินิกสามารถช่วยในการระบุและประเมินสารประกอบใหม่ที่มีเป้าหมายเฉพาะในเส้นทางการส่งสัญญาณที่เปลี่ยนแปลงซึ่งเกี่ยวข้องกับมะเร็งต่อมไทรอยด์ โดยการจำลองมะเร็งต่อมไทรอยด์ของมนุษย์ได้อย่างแม่นยำ เซลล์ C643 มีส่วนช่วยในการพัฒนาการรักษาที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นสำหรับผู้ป่วยที่มีมะเร็งต่อมไทรอยด์ระยะลุกลาม

Tissue
ต่อมไทรอยด์ชนิดอะนาพลาสติก
Disease
มะเร็งต่อมไทรอยด์ชนิดแอนาพลาสติก
Synonyms
  • C 643
  • C-643
  • c643

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
C643 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300298)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5969

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม. จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ภายในประมาณ 3 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
76 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน