HK-CRISPR-Nup188-mEGFP

HK-CRISPR-Nup188-mEGFP เป็นสายพันธุ์เซลล์ Hela Kyoto ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรม โดยใช้เทคโนโลยี CRISPR/Cas9 เพื่อฝังยีน mEGFP (โปรตีนเรืองแสงสีเขียวชนิดโมโนเมอร์ที่เพิ่มประสิทธิภาพ) เข้าสู่ตำแหน่ง Nup188Nup188 เป็นโปรตีนนิวคลีโอพอรินที่สำคัญซึ่งเกี่ยวข้องกับคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียส มีความจำเป็นสำหรับการขนส่งโมเลกุลระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาสซึม การติดแท็ก mEGFP ช่วยให้สามารถมองเห็น Nup188 ได้แบบเรียลไทม์ ซึ่งช่วยในการศึกษาพลวัตและการทำงานของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียส

สายเซลล์นี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับนักวิจัยที่มุ่งเน้นการศึกษาการขนส่งผ่านนิวเคลียร์และชีววิทยาของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียร์ การติดแท็กด้วยสารเรืองแสงช่วยให้สามารถสังเกต Nup188 ได้ภายใต้สภาวะต่างๆ รวมถึงการทดลองด้วยยาและการดัดแปลงพันธุกรรม การประยุกต์ใช้รวมถึงการคัดกรองแบบเนื้อหาสูง การถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต และเทคนิคอื่นๆ ที่ใช้การเรืองแสง ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีคุณค่าเกี่ยวกับการขนส่งระหว่างนิวเคลียสและไซโตพลาซึม รวมถึงความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มนิวเคลียส

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.