Skip to content
L-929
Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน ปกติ ใต้ผิวหนัง บริเวณเต้านม และไขมัน
Synonyms
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Documents

L-929

Cell line · Product number 400260

L-929 cells are a fibroblast-like cell line derived from the subcutaneous connective tissue of a 100-day-old male C3H/An mouse. Established in the 1940s, ...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ L-929 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ ซึ่งได้มาจากเนื้อเยื่อเกี่ยวพันใต้ผิวหนังของหนูเพศผู้สายพันธุ์ C3H/An อายุ 100 วัน สายพันธุ์นี้ถูกพัฒนาขึ้นในช่วงทศวรรษ 1940 และได้กลายเป็นสายพันธุ์ที่สำคัญอย่างยิ่งในหลากหลายสาขาวิจัยทางชีววิทยาและการแพทย์ เนื่องจากมีความทนทาน ง่ายต่อการเพาะเลี้ยง และมีความหลากหลายในการนำไปใช้

เซลล์ L-929 มีลักษณะเด่นคือรูปร่างคล้ายแกนหมุน มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ และเจริญเติบโตแบบเกาะติด เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ และใช้เป็นแบบมาตรฐานในการประเมินความเข้ากันได้ทางชีวภาพของวัสดุและผลกระทบที่เป็นพิษของสารต่าง ๆ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในด้านวัสดุชีวภาพและวิศวกรรมเนื้อเยื่อ

เซลล์ L-929 ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาการทำงานของไซโตไคน์ โดยเฉพาะในการทดสอบกิจกรรมของปัจจัยเนโครซิส (TNF) เนื่องจากมีความไวต่อความเป็นพิษที่เกิดจาก TNF ซึ่งทำให้เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าในการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันและการอักเสบ

เซลล์ L-929 ถูกนำไปใช้ต่อในสาขาไวรัสวิทยาเป็นโฮสต์สำหรับการศึกษาการจำลองตัวของไวรัส ความไวต่อไวรัสต่างๆ เช่น ไวรัสโรคถุงหุ้มเยื่อหุ้มหัวใจติดเชื้อ (IBDV) ช่วยให้การวิจัยวงจรชีวิตของไวรัส การปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับไวรัส และประสิทธิภาพของสารต้านไวรัสเป็นไปได้

โดยรวมแล้ว สายเซลล์ L-929 เป็นทรัพยากรที่มีคุณค่าในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์และมอบแพลตฟอร์มที่หลากหลายสำหรับการศึกษาในด้านความเป็นพิษต่อเซลล์, ภูมิคุ้มกันวิทยา, ไวรัสวิทยา และวัสดุชีวภาพ

Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน ปกติ ใต้ผิวหนัง บริเวณเต้านม และไขมัน
Synonyms
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง
Doubling time
25 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
แอล-929 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400260)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Expression and susceptibility

Antigen expression
เอช-2เค
Viruses
ไวรัสเอคโทรเมเลีย (ฝีดาษหนู): ผลลบ
Virus resistance
โปลิโอไวรัส 1, 2, 3, คอกซากีไวรัส B5, โพลิโอมาไวรัส
Reverse transcriptase
บวก

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 ถึง 3 x 104 เซลล์/ซม.2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
24 ถึง 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
ซี3เอช/แอน
Donor age
100 วัน