İçeriğe atla
SK-MEL-28
Doku
Cilt
Hastalık
Kutanöz melanom
Eş anlamlılar
SK-Mel-28, SK.MEL.28, SK-MEL 28, SK MEL-28, SK MEL 28, SK Mel 28, SKMel-28, SKMEL-28, SK-MEL28, SK-Mel28, SK Mel28, SKMEL28, SKMel28, SKmel28, SKML-28, SK28, AU-Mel, P-36, P36

SK-MEL-28

Cell line · Ürün numarası 300337

This cell line was established from an axillary lymph node of a 51-year-old male of unknown ethnicity by T.Takahashi and associates who have isolated this ce...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu hücre hattı, etnik kökeni bilinmeyen 51 yaşındaki bir erkeğin aksiller lenf düğümünden T.Takahashi ve arkadaşları tarafından bir dizi melanom hattından izole edilerek oluşturulmuştur.
Doku
Cilt
Hastalık
Kutanöz melanom
Eş anlamlılar
  • SK-Mel-28
  • SK.MEL.28
  • SK-MEL 28
  • SK MEL-28
  • SK MEL 28
  • SK Mel 28
  • SKMel-28
  • SKMEL-28
  • SK-MEL28
  • SK-Mel28
  • SK Mel28
  • SKMEL28
  • SKMel28
  • SKmel28
  • SKML-28
  • SK28
  • AU-Mel
  • P-36
  • P36

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Çokgen
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde. Malign melanom oluşturur (büyük yuvarlak hücre tipi)

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
SK-MEL-28 (Cytion katalog numarası 300337)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0526

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
P53 pozitif
İzoenzimler
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B
Mutasyon profili
BRAF V600E mut: V600E tipi BRAF Mutasyonu DNA bazlı yöntemler (sekanslama, RT-PCR) ve protein bazlı yöntemlerle (Western Blot), N-Ras wt
Ürünler
Melanin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözdürme işleminden sonra besiyeri veya alt kültür çıkarılana kadar en az 48 saat bekletin
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
51 yıl