Gå direkte til indholdet
SK-MEL-28
Væv
Hud
Sygdom
Kutan melanom
Synonymer
SK-Mel-28, SK.MEL.28, SK-MEL 28, SK MEL-28, SK MEL 28, SK Mel 28, SKMel-28, SKMEL-28, SK-MEL28, SK-Mel28, SK Mel28, SKMEL28, SKMel28, SKmel28, SKML-28, SK28, AU-Mel, P-36, P36

Dokumenter

SK-MEL-28

Cell line · Varenummer 300337

This cell line was established from an axillary lymph node of a 51-year-old male of unknown ethnicity by T.Takahashi and associates who have isolated this ce...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
Denne cellelinje blev etableret fra en aksillær lymfeknude fra en 51-årig mand af ukendt etnicitet af T. Takahashi og medarbejdere, som har isoleret denne cellelinje i en serie af melanomlinjer.
Væv
Hud
Sygdom
Kutan melanom
Synonymer
  • SK-Mel-28
  • SK.MEL.28
  • SK-MEL 28
  • SK MEL-28
  • SK MEL 28
  • SK Mel 28
  • SKMel-28
  • SKMEL-28
  • SK-MEL28
  • SK-Mel28
  • SK Mel28
  • SKMEL28
  • SKMel28
  • SKmel28
  • SKML-28
  • SK28
  • AU-Mel
  • P-36
  • P36

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Polygonal
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus. Danner malignt melanom (stor rundcelletype)

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-MEL-28 (Cytion katalognummer 300337)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0526

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53-positiv
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B
Mutationsprofil
BRAF V600E mut: BRAF-mutation af V600E-typen blev bestemt ved DNA-baserede metoder (sekventering, RT-PCR) og proteinbaserede metoder (Western Blot), N-Ras wt
Produkter
Melanin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Lad det stå mindst 48 timer efter optøning indtil fjernelse af medium eller subkultur
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
51 år