Gå direkte til indholdet
SK-MES-1
Væv
Lunge
Sygdom
Pladecellekarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Dokumenter

SK-MES-1

Cell line · Varenummer 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

SK-MES-1 er en human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cellelinje, der i vid udstrækning anvendes i lungekræftforskning, især i undersøgelser med fokus på den næstmest almindelige undertype af ikke-småcellet lungekræft (NSCLC). SK-MES-1-celler er kendetegnet ved en høj mutationsrate i tumorundertrykkergenet p53, som er involveret i deres modstandsdygtighed over for apoptose og forskellige kemoterapier. Denne cellelinje fungerer som en vigtig model til evaluering af nye terapeutiske strategier mod pladecellecarcinom i lungerne, især for lægemidler, der er rettet mod cellecyklus og apoptose.

Undersøgelser med SK-MES-1 har vist, at cellelinjen reagerer på platinbaserede kemoterapimidler som lobaplatin, der fremkalder apoptose via både intrinsiske og extrinsiske veje. Lobaplatin, en tredjegenerations platinforbindelse, har vist sig at hæmme SK-MES-1-proliferation ved at inducere S-fase-cellecyklusstop og fremme apoptose gennem opregulering af pro-apoptotiske proteiner som Bax og nedregulering af anti-apoptotiske proteiner som Bcl-2. Derudover udviste SK-MES-1-celler behandlet med lobaplatin en stigning i caspase-3-, -8- og -9-aktivering, hvilket yderligere understøtter inddragelsen af mitokondriemedieret apoptose.

SK-MES-1 er også blevet brugt til at undersøge virkningerne af andre stoffer, f.eks. costunolid, et fytokemikalie, der inducerer G1/S-fase-cellecyklusstop og apoptose via en mitokondrieafhængig vej. Behandling med costunolid øger udtrykket af p53 og Bax, mens Bcl-2-niveauerne reduceres, og mitokondriernes membranpotentiale forstyrres, hvilket yderligere bekræfter SK-MES-1's anvendelighed til at studere apoptose-relaterede veje i pladeepitelkarcinom i lungerne.

Væv
Lunge
Sygdom
Pladecellekarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
Stammekromosomantallet er hypotriploidt, og 2S-komponenten forekommer i 3,2 % af tilfældene. Sytten til 20 markørkromosomer var fælles for de fleste S-metafaser. Normale x-, 13- og 19-kromosomer var fraværende, og kromosomerne 2, 3, 14, 17 og 20 var generelt monosomiske. Y-kromosomet blev ikke påvist ved hjælp af QM-farvning.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-MES-1 (Cytion katalognummer 300339)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53 negativ
Isoenzymer
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0132

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
65 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk