Pāriet uz saturu
SK-MES-1
Audums
Plaušas
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Dokumenti

SK-MES-1

Cell line · Preces numurs 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SK-MES-1 ir cilvēka plaušu plakanšūnu karcinomas (LSQCC) šūnu līnija, ko plaši izmanto plaušu vēža pētījumos, jo īpaši pētījumos, kuros uzmanība pievērsta otram visbiežāk sastopamajam nesmalto šūnu plaušu vēža (NSCLC) apakštipam. SK-MES-1 šūnām ir raksturīgs augsts mutuāciju skaits audzēju nomācošajā gēnā p53, kas ir saistīts ar to rezistenci pret apoptozi un dažādām ķīmijterapijām. Šī šūnu līnija kalpo kā svarīgs modelis, lai novērtētu jaunas terapeitiskās stratēģijas pret plaušu plakanšūnu karcinomu, jo īpaši attiecībā uz zālēm, kas iedarbojas uz šūnu ciklu un apoptozes ceļiem.

Pētījumi ar SK-MES-1 liecina, ka šī šūnu līnija ir jutīga pret ķīmijterapijas līdzekļiem uz platīna bāzes, piemēram, lobaplatīnu, kas izraisa apoptozi, izmantojot gan iekšējos, gan ārējos ceļus. Ir pierādīts, ka lobaplatīns, trešās paaudzes platīna savienojums, inhibē SK-MES-1 proliferāciju, izraisot S fāzes šūnu cikla apstāšanos un veicinot apoptozi, palielinot proapoptozes proteīnu, piemēram, Bax, un samazinot anti-apoptozes proteīnu, piemēram, Bcl-2, regulāciju. Turklāt SK-MES-1 šūnās, kas apstrādātas ar lobaplatīnu, palielinājās kaspāzes-3, -8 un -9 aktivācija, kas vēl vairāk apstiprina mitohondriju mediētās apoptozes iesaistīšanos.

SK-MES-1 tika izmantota arī citu savienojumu, piemēram, fitoķīmiskās vielas kostunolida, kas izraisa G1/S fāzes šūnu cikla apstāšanos un apoptozi, izmantojot no mitohondrijiem atkarīgu ceļu, iedarbības pētīšanai. Iedarbība ar kostunolidu palielina p53 un Bax ekspresiju, vienlaikus samazinot Bcl-2 līmeni un izjaucot mitohondriālās membrānas potenciālu, kas vēl vairāk apstiprina SK-MES-1 lietderību ar apoptozi saistīto ceļu pētniecībā plaušu plakanas karcinomas gadījumā.

Audums
Plaušas
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Kariotips
Cilmes hromosomu skaits ir hipotriploīds, un 2S komponents sastopams 3,2 % apmērā. Lielākajai daļai S metafāžu bija raksturīgas 17 līdz 20 marķieru hromosomas. Normālas x, 13 un 19 hromosomas nebija, un 2., 3., 14., 17. un 20. hromosoma parasti bija monosomiska. Y hromosomu ar QM krāsojumu neatklāja.

04Identifikatori

Atsauce
SK-MES-1 (Cytion kataloga numurs 300339)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
P53 negatīvs
Izoenzīmi
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0132

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
65 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis