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SK-MES-1
Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de células escamosas
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Documentos

SK-MES-1

Cell line · Número do produto 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Recomendado (lote mais recente)
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1

01Informações gerais

Descrição

A SK-MES-1 é uma linha celular de carcinoma de células escamosas do pulmão humano (LSQCC) amplamente utilizada na investigação do cancro do pulmão, particularmente em estudos centrados no segundo subtipo mais comum de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC). As células SK-MES-1 caracterizam-se por uma elevada taxa de mutações no gene supressor de tumores p53, que está implicado na sua resistência à apoptose e a várias quimioterapias. Esta linha celular constitui um modelo importante para a avaliação de novas estratégias terapêuticas contra o carcinoma espinocelular do pulmão, nomeadamente para os fármacos que visam o ciclo celular e as vias apoptóticas.

Estudos realizados com a SK-MES-1 demonstraram que a linha celular responde a agentes quimioterapêuticos à base de platina, como a lobaplatina, que induzem a apoptose através das vias intrínseca e extrínseca. Foi demonstrado que a lobaplatina, um composto de platina de terceira geração, inibe a proliferação da SK-MES-1 induzindo a paragem do ciclo celular na fase S e promovendo a apoptose através da regulação positiva de proteínas pró-apoptóticas como a Bax e da regulação negativa de proteínas anti-apoptóticas como a Bcl-2. Além disso, as células SK-MES-1 tratadas com lobaplatina exibiram um aumento na ativação da caspase-3, -8 e -9, apoiando ainda mais o envolvimento da apoptose mediada por mitocôndrias.

O SK-MES-1 também foi utilizado para estudar os efeitos de outros compostos, como o costunolide, um fitoquímico que induz a paragem do ciclo celular na fase G1/S e a apoptose através de uma via dependente da mitocôndria. O tratamento com costunolide aumenta a expressão de p53 e Bax, enquanto reduz os níveis de Bcl-2 e perturba o potencial da membrana mitocondrial, confirmando ainda mais a utilidade do SK-MES-1 no estudo das vias relacionadas com a apoptose no carcinoma escamoso do pulmão.

Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de células escamosas
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Cariótipo
O número de cromossomas da linha-tronco é hipotriplóide, com o componente 2S a ocorrer em 3,2%. Dezassete a 20 cromossomas marcadores eram comuns à maioria das metáfases S. Os cromossomas x, 13 e 19 normais estavam ausentes e os cromossomas 2, 3, 14, 17 e 20 eram geralmente monossómicos. O cromossoma Y não foi detectado com a coloração QM.

04Identificadores

Referência
SK-MES-1 (número de catálogo Cytion 300339)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
P53 negativo
Isoenzimas
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0132

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
65 anos
Etnia
Caucasiano