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SK-MES-1
Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Documenti

SK-MES-1

Cell line · Codice prodotto 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

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01Informazioni generali

Descrizione

SK-MES-1 è una linea cellulare umana di carcinoma polmonare a cellule squamose (LSQCC) ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro del polmone, in particolare negli studi incentrati sul secondo sottotipo più comune di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC). Le cellule SK-MES-1 sono caratterizzate da un alto tasso di mutazioni nel gene soppressore del tumore p53, che è implicato nella loro resistenza all'apoptosi e a vari chemioterapici. Questa linea cellulare è un modello importante per valutare nuove strategie terapeutiche contro il carcinoma polmonare a cellule squamose, in particolare per i farmaci che mirano al ciclo cellulare e alle vie apoptotiche.

Gli studi condotti su SK-MES-1 hanno dimostrato che questa linea cellulare è sensibile agli agenti chemioterapici a base di platino, come il lobaplatino, che inducono l'apoptosi attraverso le vie intrinseca ed estrinseca. È stato dimostrato che il lobaplatino, un composto di platino di terza generazione, inibisce la proliferazione di SK-MES-1 inducendo l'arresto del ciclo cellulare in fase S e promuovendo l'apoptosi attraverso l'upregolazione di proteine pro-apoptotiche come Bax e la downregulation di proteine anti-apoptotiche come Bcl-2. Inoltre, le cellule SK-MES-1 trattate con lobaplatino hanno mostrato un aumento dell'attivazione delle caspasi-3, -8 e -9, a ulteriore sostegno del coinvolgimento dell'apoptosi mediata dai mitocondri.

L'SK-MES-1 è stato utilizzato anche per studiare gli effetti di altri composti, come il costunolide, un fitochimico che induce l'arresto del ciclo cellulare in fase G1/S e l'apoptosi attraverso una via dipendente dai mitocondri. Il trattamento con costunolide aumenta l'espressione di p53 e Bax, riducendo i livelli di Bcl-2 e interrompendo il potenziale di membrana mitocondriale, confermando ulteriormente l'utilità di SK-MES-1 nello studio delle vie legate all'apoptosi nel carcinoma squamoso del polmone.

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Cariotipo
Il numero di cromosomi della linea staminale è ipotriploide, con la componente 2S presente al 3,2%. Nella maggior parte delle metafasi S erano presenti da 17 a 20 cromosomi marcatori. I cromosomi normali x, 13 e 19 erano assenti e i cromosomi 2, 3, 14, 17 e 20 erano generalmente monosomici. Il cromosoma Y non è stato rilevato con la colorazione QM.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SK-MES-1 (numero di catalogo Cytion 300339)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53 negativo
Isoenzimi
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0132

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
65 anni
Etnia
Caucasico