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SK-OV-3
Tessuto
Ovaio
Malattia
Cistoadenocarcinoma sieroso
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
SKOV-3, SK-OV3, SK.OV.3, SKOV3, Skov3, SKO3

Documenti

SK-OV-3

Cell line · Codice prodotto 300342

SK-OV-3 cells, also known as SKOV3 cells, were derived from the ascitic fluid of a 64-year-old Caucasian female with ovarian cancer, are used in the study...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule SK-OV-3, note anche come cellule SKOV3, sono state ricavate dal liquido ascitico di una donna caucasica di 64 anni affetta da cancro ovarico e vengono utilizzate nello studio del cistadenocarcinoma sieroso, un sottotipo di carcinoma ovarico. Queste cellule sono note per la loro resistenza al fattore di necrosi tumorale e a vari farmaci citotossici, tra cui il cisplatino, evidenziando le sfide nella chemioterapia per il trattamento del cancro ovarico e rendendole un modello eccellente per lo studio dei meccanismi alla base della resistenza al cisplatino e per l'esplorazione di nuove strategie terapeutiche.

Il sistema antiossidante, compreso il sistema antiossidante tioredossina (Trx), svolge un ruolo cruciale nella sopravvivenza e nella resistenza delle cellule SK-OV-3, offrendo un bersaglio per interventi volti a sensibilizzare le cellule tumorali alla chemioterapia. L'uso di composti come la quercetina per modulare il sistema antiossidante e indurre l'apoptosi nelle cellule SK-OV-3 evidenzia il potenziale degli antiossidanti alimentari nella terapia del cancro.

Oltre al loro ruolo nello studio della resistenza ai farmaci, le cellule SK-OV-3 sono utilizzate per studiare il comportamento invasivo delle cellule di carcinoma ovarico e l'interazione tra le cellule tumorali e il microambiente tumorale, compreso il ruolo dei macrofagi M0 e M2 nella progressione del tumore. L'applicazione delle cellule SK-OV-3 nella ricerca sul cancro si estende allo sviluppo di modelli di xenotrapianto e all'uso di geni reporter, come firefly-Luc, per monitorare la crescita tumorale e le metastasi in vivo.

Nel complesso, le cellule SK-OV-3 costituiscono un modello fondamentale per comprendere la complessità del cancro ovarico, dai meccanismi molecolari che determinano la resistenza e la segnalazione degli estrogeni all'interazione tra le cellule tumorali e il microambiente tumorale.

Tessuto
Ovaio
Malattia
Cistoadenocarcinoma sieroso
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
  • SKOV-3
  • SK-OV3
  • SK.OV.3
  • SKOV3
  • Skov3
  • SKO3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
Forma un adenocarcinoma moderatamente ben differenziato coerente con il primitivo ovarico
Cariotipo
(P16) da ipodiploide a ipotetraploide con dicentri e telocentri grandi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SK-OV-3 (numero di catalogo Cytion 300342)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0532

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0311

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
64 anni
Etnia
Caucasico