Pereiti prie turinio
SK-MES-1
Audinys
Plaučiai
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Dokumentai

SK-MES-1

Cell line · Prekės numeris 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SK-MES-1 yra žmogaus plaučių plokščialąstelinės karcinomos (LSQCC) ląstelių linija, plačiai naudojama plaučių vėžio tyrimuose, ypač tyrimuose, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama antram pagal dažnumą nesmulkialąstelinio plaučių vėžio (NSLPV) potipiui. SK-MES-1 ląstelėms būdingas didelis naviką slopinančio geno p53 mutacijų skaičius, kuris lemia jų atsparumą apoptozei ir įvairiems chemoterapijos metodams. Ši ląstelių linija yra svarbus modelis naujoms gydymo strategijoms prieš plaučių plokščialąstelinę karcinomą, ypač vaistams, kurie veikia ląstelių ciklą ir apoptozės kelius, vertinti.

Tyrimai su SK-MES-1 parodė, kad ši ląstelių linija reaguoja į platinos pagrindu veikiančius chemoterapijos preparatus, pavyzdžiui, lobaplatiną, kurie sukelia apoptozę tiek vidiniu, tiek išoriniu keliu. Nustatyta, kad lobaplatinas, trečiosios kartos platinos junginys, slopina SK-MES-1 proliferaciją, sukeldamas S fazės ląstelių ciklo sustojimą ir skatindamas apoptozę dėl proapoptozės baltymų, tokių kaip Bax, padidėjimo ir antiapoptozės baltymų, tokių kaip Bcl-2, sumažėjimo. Be to, lobaplatinu apdorotose SK-MES-1 ląstelėse padidėjo kaspazės-3, -8 ir -9 aktyvacija, o tai dar labiau patvirtina, kad apoptozė vyksta per mitochondrijas.

SK-MES-1 taip pat buvo naudojamas kitų junginių, pavyzdžiui, fitocheminės medžiagos kostunolido, kuris sukelia G1/S fazės ląstelių ciklo sustojimą ir apoptozę nuo mitochondrijų priklausomu būdu, poveikiui tirti. Gydymas kostunolidu didina p53 ir Bax ekspresiją, kartu mažindamas Bcl-2 kiekį ir sutrikdydamas mitochondrijų membranos potencialą, o tai dar kartą patvirtina SK-MES-1 naudingumą tiriant su apoptoze susijusius plaučių plokščiosios karcinomos kelius.

Audinys
Plaučiai
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Kariotipas
Kamieninių chromosomų skaičius yra hipotriploidinis, o 2S komponentas sudaro 3,2 %. Daugumai S metafazių būdinga nuo 17 iki 20 žyminių chromosomų. Normalių x, 13 ir 19 chromosomų nebuvo, o 2, 3, 14, 17 ir 20 chromosomos paprastai buvo monosominės. Y chromosoma nebuvo aptikta dažant QM.

04Identifikatoriai

Nuoroda
SK-MES-1 (Cytion katalogo numeris 300339)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 neigiamas
Izofermentai
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Fenotipo dažnio produktas: 0.0132

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
65 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių