Pereiti prie turinio
SK-BR-3
Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Invazinė duktalinė karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumentai

SK-BR-3

Cell line · Prekės numeris 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SK-BR-3 ląstelės - tai žmogaus krūties vėžio ląstelių linija, išskirta iš 43 metų pacientės, sergančios metastazavusiu krūties vėžiu, pleuros išskyrų. SKBR3 ląstelės buvo sukurtos XX a. septintojo dešimtmečio pradžioje ir yra žinomos dėl pernelyg didelės žmogaus epidermio augimo faktoriaus receptoriaus 2 (HER2) - receptoriaus tirozino kinazės, kuri atlieka lemiamą vaidmenį tam tikrų tipų krūties vėžio patogenezėje ir progresavime - ekspresijos.

Šiai ląstelių linijai būdingos krūties vėžiui būdingos genetinės aberacijos, įskaitant HER2 geno amplifikaciją ir naviką slopinančio geno p53 mutacijas. Dėl pernelyg didelės HER2 ekspresijos SK-BR-3 ląstelėse jos yra vertingas HER2 teigiamo krūties vėžio, kuriam būdingas agresyvus augimas ir bloga prognozė, tyrimo modelis ir į HER2 nukreiptos terapijos modelis. SK-BR-3 ląstelės buvo labai svarbios tiriant trastuzumabą (Herceptin) - monokloninį antikūną prieš HER2, kuris tapo kertiniu HER2 teigiamo krūties vėžio gydymo elementu.

SK-BR-3 ląstelės pasižymi dideliu in vitro augimo greičiu ir buvo naudojamos įvairiose eksperimentinėse sistemose, įskaitant ląstelių signalų, atsparumo vaistams, apoptozės ir vėžio ląstelių ciklo tyrimus. Šios ląstelės taip pat yra pagrindinis šaltinis gaminant monokloninius antikūnus ir tiriant imuninį atsaką į krūties vėžio ląsteles.

Apibendrinant galima teigti, kad SK-BR-3 ląstelių linija yra nepakeičiamas krūties vėžio tyrimų įrankis, leidžiantis giliai pažinti HER2 teigiamų navikų biologiją ir palengvinantis tikslinių terapijų, kurios gerokai pagerino šia sudėtinga vėžio forma sergančių pacientų perspektyvas, kūrimą.

Audinys
Krūtys, pieno liauka
Liga
Invazinė duktalinė karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms susidaro silpnai diferencijuota adenokarcinoma
Kariotipas
(P9) nuo hipertriploidinių iki hipotetraploidinių (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D), turinčių anomalijų, įskaitant dicentrikus, akrocentrinius fragmentus, žiedus, antrinius susiaurėjimus, didelius metacentrikus arba policentrikus ir dideles submetacentrines žymes
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
30 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
SK-BR-3 (Cytion katalogo numeris 300333)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas
Antigeno ekspresija
A kraujo grupė, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Izofermentai
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipo dažnio produktas: 0.0044
Mutacijų profilis
TP53 mutavimas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
McCoys 5a, w: 3,0 g/l gliukozės, w: stabilus glutaminas, w: 2,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820200a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
Pradėkite kultūrą iš kriovialo, esant 3 x 104 ląstelėms/cm2. Tęsiant subkultūras naudokite 2 x 104 ląsteles/cm2.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
43 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių