Siirry sisältöön
SK-BR-3
Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Asiakirjat

SK-BR-3

Cell line · Tuotenumero 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SK-BR-3-solut ovat ihmisen rintasyöpäsolulinja, joka on eristetty 43-vuotiaan, metastaattista rintasyöpää sairastavan naispotilaan pleuraeritteestä. SKBR3-solut on perustettu 1970-luvun alussa, ja ne tunnetaan siitä, että niissä esiintyy liikaa ihmisen epidermisen kasvutekijän reseptori 2:ta (HER2), reseptori-tyrosiinikinaasia, jolla on kriittinen rooli tiettyjen rintasyöpätyyppien patogeneesissä ja etenemisessä.

Solulinjalle on ominaista rintasyövässä yleiset geneettiset poikkeavuudet, kuten HER2-geenin monistuminen ja p53-kasvainsuppressorigeenin mutaatiot. HER2:n yliekspressio SK-BR-3-soluissa tekee niistä arvokkaan mallin HER2-positiivisen rintasyövän tutkimiseen, jolle on ominaista aggressiivinen kasvu ja huono ennuste, sekä HER2:een kohdennettujen hoitojen tutkimiseen. SK-BR-3-solut ovat olleet keskeisessä asemassa tutkittaessa trastutsumabia (Herceptin), HER2:n vastaista monoklonaalista vasta-ainetta, josta on tullut HER2-positiivisen rintasyövän hoidon kulmakivi.

SK-BR-3-soluilla on vankka in vitro -kasvu, ja niitä on käytetty erilaisissa koejärjestelyissä, kuten solujen signalointia, lääkeresistenssiä, apoptoosia ja syövän solusykliä koskevissa tutkimuksissa. Nämä solut ovat myös keskeinen resurssi monoklonaalisten vasta-aineiden tuotannossa ja rintasyöpäsolujen immuunivasteen tutkimuksessa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että SK-BR-3-solulinja on välttämätön väline rintasyöpätutkimuksessa, sillä se tarjoaa syvällistä tietoa HER2-positiivisten kasvainten biologiasta ja helpottaa sellaisten kohdennettujen hoitojen kehittämistä, jotka ovat parantaneet merkittävästi tätä haastavaa syöpämuotoa sairastavien potilaiden näkymiä.

Kudos
Rinta, rintarauhanen
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä muodostaa heikosti erilaistunutta adenokarsinoomaa
Karyotyyppi
(P9) hypertriploidista hypotetraploidiin (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D), joilla on poikkeavuuksia, kuten diksentrisiä, akrosentrisiä fragmentteja, renkaita, sekundaarisia supistumia, suuria metasentrisiä tai polysentrisiä ja suuria submetasentrisiä merkkejä
Kaksinkertaistumisaika
30 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SK-BR-3 (Cytionin luettelonumero 300333)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53-positiivinen
Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoentsyymit
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0044
Mutaatioprofiili
TP53 mut

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Aloita viljely kryoputkesta 3 x 104 solua/cm2. Käytä 2 x 104 solua/cm2 jatkuviin aliviljelmiin.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
43 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen