Prejsť na obsah
SK-BR-3
Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Invazívny duktálny karcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumenty

SK-BR-3

Cell line · Číslo výrobku 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky SK-BR-3 sú ľudskou bunkovou líniou karcinómu prsníka izolovanou z pleurálneho výpotku 43-ročnej pacientky s metastatickým karcinómom prsníka. Bunky SKBR3 boli vytvorené začiatkom 70. rokov 20. storočia a sú známe nadmernou expresiou ľudského receptora pre epidermálny rastový faktor 2 (HER2), receptorovej tyrozínkinázy, ktorá zohráva kľúčovú úlohu v patogenéze a progresii niektorých typov rakoviny prsníka.

Bunková línia sa vyznačuje genetickými aberáciami bežnými pri rakovine prsníka vrátane amplifikácie génu HER2 a mutácií v tumor supresorovom géne p53. Nadmerná expresia HER2 v bunkách SK-BR-3 z nich robí cenný model na štúdium HER2-pozitívneho karcinómu prsníka, ktorý sa vyznačuje agresívnym rastom a zlou prognózou, a na terapiu cielenú na HER2. Bunky SK-BR-3 zohrali dôležitú úlohu pri štúdiu trastuzumabu (Herceptin), monoklonálnej protilátky proti HER2, ktorá sa stala základom liečby HER2-pozitívneho karcinómu prsníka.

Bunky SK-BR-3 vykazujú robustnú rýchlosť rastu in vitro a používajú sa v rôznych experimentálnych zostavách vrátane štúdií bunkovej signalizácie, rezistencie na lieky, apoptózy a rakovinového bunkového cyklu. Tieto bunky sú tiež kľúčovým zdrojom na výrobu monoklonálnych protilátok a na výskum imunitnej odpovede na bunky rakoviny prsníka.

Celkovo je bunková línia SK-BR-3 nenahraditeľným nástrojom vo výskume rakoviny prsníka, ktorý ponúka hlboký pohľad na biológiu HER2-pozitívnych nádorov a uľahčuje vývoj cielených terapií, ktoré výrazne zlepšili vyhliadky pacientov s touto náročnou formou rakoviny.

Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Invazívny duktálny karcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, u nahých myší vytvára slabo diferencovaný adenokarcinóm
Karyotyp
(P9) hypertriploidné až hypotetraploidné (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) s abnormalitami vrátane dicentrických, akrocentrických fragmentov, prstencov, sekundárnych zúžení, veľkých metacentrických alebo polycentrických a veľkých submetacentrických markerov
Doba zdvojnásobenia
30 hodín

04Identifikátory

Citácia
SK-BR-3 (katalógové číslo Cytion 300333)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
P53 pozitívny
Expresia antigénu
Krvná skupina A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Izoenzýmy
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, produkt frekvencie fenotypu: 0.0044
Mutčný profil
Mutácia TP53

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilný glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
Začnite kultiváciu z kryovialky pri 3 x 104 bunkách/cm2. Pre pokračovanie subkultivácie použite 2 x 104 buniek/cm2.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
43 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský