Aller directement au contenu
SK-BR-3
Tissu
Sein, glande mammaire
Maladie
Carcinome canalaire invasif
Site métastatique
Épanchement pleural
Synonymes
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Documents

SK-BR-3

Cell line · Référence du produit 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules SK-BR-3 sont une lignée cellulaire humaine de cancer du sein isolée à partir de l'épanchement pleural d'une patiente de 43 ans atteinte d'un cancer du sein métastatique. Les cellules SKBR3 ont été créées au début des années 1970 et sont connues pour leur surexpression du récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2), un récepteur tyrosine kinase qui joue un rôle essentiel dans la pathogenèse et la progression de certains types de cancer du sein.

La lignée cellulaire est caractérisée par des aberrations génétiques communes au cancer du sein, notamment l'amplification du gène HER2 et des mutations du gène suppresseur de tumeur p53. La surexpression de HER2 dans les cellules SK-BR-3 en fait un modèle précieux pour l'étude du cancer du sein HER2-positif, qui se caractérise par une croissance agressive et un mauvais pronostic, et pour les thérapies ciblant HER2. Les cellules SK-BR-3 ont joué un rôle déterminant dans l'étude du trastuzumab (Herceptin), un anticorps monoclonal contre HER2 qui est devenu la pierre angulaire du traitement du cancer du sein HER2-positif.

Les cellules SK-BR-3 présentent un taux de croissance in vitro robuste et ont été utilisées dans une variété de montages expérimentaux, y compris des études sur la signalisation cellulaire, la résistance aux médicaments, l'apoptose et le cycle cellulaire du cancer. Ces cellules sont également une ressource clé pour la production d'anticorps monoclonaux et pour la recherche sur la réponse immunitaire aux cellules cancéreuses du sein.

En résumé, la lignée cellulaire SK-BR-3 est un outil indispensable à la recherche sur le cancer du sein, car elle permet de mieux comprendre la biologie des tumeurs HER2-positives et facilite le développement de thérapies ciblées qui ont considérablement amélioré les perspectives des patientes atteintes de cette forme difficile de cancer.

Tissu
Sein, glande mammaire
Maladie
Carcinome canalaire invasif
Site métastatique
Épanchement pleural
Synonymes
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, chez la souris nude, forme un adénocarcinome peu différencié
Caryotype
(P9) hypertriploïde à hypotétraploïde (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) avec des anomalies comprenant des dicentriques, des fragments acrocentriques, des anneaux, des constrictions secondaires, de grands métacentriques ou polycentriques et un grand marqueur submétacentrique
Temps de doublement
30 heures

04Identifiants

Référence
SK-BR-3 (numéro de catalogue Cytion 300333)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
P53 positif
Expression des antigènes
Groupe sanguin A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Phénotype Fréquence Produit : 0.0044
Profil mutationnel
TP53 mut

06Manipulation et culture

Milieu de culture
McCoys 5a, w : 3.0 g/L Glucose, w : Glutamine stable, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820200a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
Démarrer la culture à partir d'une cryotube à 3 x 104 cellules/cm2. Utiliser 2 x 104 cellules/cm2 pour les subcultures successives.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
43 ans
Origine ethnique
Caucasien