Mine otse sisu juurde
SK-BR-3
Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumendid

SK-BR-3

Cell line · Toote number 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-BR-3 rakud on inimese rinnavähi rakuliin, mis on isoleeritud 43-aastase metastaatilise rinnavähiga naissoost patsiendi pleuraefusioonist. SKBR3 rakud loodi 1970ndate alguses ja on tuntud inimese epidermise kasvufaktori retseptori 2 (HER2) üleekspressiooni poolest, mis on retseptori türosiini kinaas, millel on oluline roll teatud tüüpi rinnavähi patogeneesis ja progresseerumises.

Rakuliinile on iseloomulikud rinnavähi puhul levinud geneetilised aberratsioonid, sealhulgas HER2 geeni amplifikatsioon ja mutatsioonid p53 kasvajasupressorgeenis. HER2 üleekspressioon SK-BR-3 rakkudes teeb neist väärtusliku mudeli HER2-positiivse rinnavähi uurimiseks, mida iseloomustab agressiivne kasv ja halb prognoos, ning HER2-le suunatud ravimeetodite jaoks. SK-BR-3 rakud on olnud olulised HER2-vastase monoklonaalse antikeha trastuzumabi (Herceptin) uurimisel, millest on saanud HER2-positiivse rinnavähi ravi nurgakivi.

SK-BR-3 rakkudel on tugev in vitro kasvutempo ja neid on kasutatud mitmesugustes katsesüsteemides, sealhulgas rakusignaalide, ravimiresistentsuse, apoptoosi ja vähirakkude tsükli uuringutes. Need rakud on ka peamine ressurss monoklonaalsete antikehade tootmiseks ja rinnavähirakkude immuunvastuse uurimiseks.

Kokkuvõttes on SK-BR-3 rakuliin asendamatu vahend rinnavähi uurimisel, pakkudes põhjalikke teadmisi HER2-positiivsete kasvajate bioloogiast ja hõlbustades sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamist, mis on oluliselt parandanud selle raske vähivormiga patsientide väljavaateid.

Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, moodustab alasti hiirtel halvasti diferentseerunud adenokartsinoomi
Karyotüüp
(P9) hüpertriploidne kuni hüpotetraploidne (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D), millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas ditsentrilised, akrotsentrilised fragmendid, rõngad, sekundaarsed ahenemised, suured metatsentrilised või polütsentrilised ja suured submetatsentrilised markerid
Kahekordistumisaeg
30 tundi

04Tunnused

Viide
SK-BR-3 (Cytioni katalooginumber 300333)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0044
Mutatsiooniprofiil
TP53 mut

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükoos, w: stabiilne glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Alusta kultuuri kasvatamist krüoviaalist 3 x 104 rakku/cm2. Kasuta 2 x 104 rakku/cm2 jätkuvateks subkultuurideks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
43 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia