Gå til innholdet
SK-BR-3
Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumenter

SK-BR-3

Cell line · Produktnummer 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SK-BR-3-celler er en human brystkreftcellelinje som ble isolert fra pleuraeffusjonen til en 43 år gammel kvinnelig pasient med metastatisk brystkreft. SKBR3-celler ble etablert på begynnelsen av 1970-tallet og er kjent for sitt overuttrykk av den humane epidermale vekstfaktorreseptor 2 (HER2), en reseptortyrosinkinase som spiller en kritisk rolle i patogenesen og utviklingen av visse typer brystkreft.

Cellelinjen er karakterisert av genetiske avvik som er vanlige ved brystkreft, inkludert amplifikasjon av HER2-genet og mutasjoner i p53-tumorsuppressorgenet. Overuttrykket av HER2 i SK-BR-3-celler gjør dem til en verdifull modell for studier av HER2-positiv brystkreft, som kjennetegnes av aggressiv vekst og dårlig prognose, og for HER2-målrettede terapier. SK-BR-3-celler har vært avgjørende i studien av trastuzumab (Herceptin), et monoklonalt antistoff mot HER2 som har blitt en hjørnestein i behandlingen av HER2-positiv brystkreft.

SK-BR-3-celler har en robust in vitro-veksthastighet og har blitt brukt i en rekke eksperimentelle oppsett, blant annet i studier av cellesignalering, legemiddelresistens, apoptose og kreftcellesyklus. Disse cellene er også en viktig ressurs for produksjon av monoklonale antistoffer og for forskning på immunresponsen mot brystkreftceller.

SK-BR-3-cellelinjen er et uunnværlig verktøy i brystkreftforskningen, og den gir dyp innsikt i biologien til HER2-positive svulster og har gjort det mulig å utvikle målrettede behandlinger som har forbedret utsiktene for pasienter med denne utfordrende kreftformen betydelig.

Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus, danner lite differensiert adenokarsinom
Karyotype
(P9) hypertriploid til hypotetraploid (+A, +B, +C, +E, +E, +F, +G, -D) med abnormaliteter som omfatter diksentrik, akrocentriske fragmenter, ringer, sekundære innsnevringer, stor metasentrik eller polysentrik og stor submetasentrisk markør
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-BR-3 (Cytion-katalognummer 300333)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53-positiv
Antigenuttrykk
Blodtype A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0044
Mutasjonsprofil
TP53 mut

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
McCoys 5a, m: 3,0 g/L glukose, m: stabil glutamin, m: 2,0 mM natriumpyruvat, m: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820200a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
Start kulturen fra kryorør med 3 x 104 celler/cm2. Bruk 2 x 104 celler/cm2 for videre subkulturer.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
43 år
Etnisitet
Kaukasisk