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SK-BR-3
Tissue
Sein, glande mammaire
Disease
Carcinome canalaire invasif
Metastatic site
Épanchement pleural
Synonyms
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

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SK-BR-3

Cell line · Product number 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

Les cellules SK-BR-3 constituent une lignée cellulaire de cancer du sein humain isolée à partir de l’épanchement pleural d’une patiente de 43 ans atteinte d’un cancer du sein métastatique. Les cellules SK-BR-3 ont été établies au début des années 1970 et sont connues pour leur surexpression du récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2), une tyrosine kinase de récepteur qui joue un rôle crucial dans la pathogenèse et la progression de certains types de cancer du sein.

Cette lignée cellulaire se caractérise par des anomalies génétiques courantes dans le cancer du sein, notamment l’amplification du gène HER2 et des mutations du gène suppresseur de tumeur p53. La surexpression de HER2 dans les cellules SK-BR-3 en fait un modèle précieux pour l’étude du cancer du sein HER2-positif, caractérisé par une croissance agressive et un mauvais pronostic, ainsi que pour les thérapies ciblant HER2. Les cellules SK-BR-3 ont joué un rôle déterminant dans l’étude du trastuzumab (Herceptin), un anticorps monoclonal dirigé contre HER2 qui est devenu un pilier du traitement du cancer du sein HER2-positif.

Les cellules SK-BR-3 présentent un taux de croissance in vitro élevé et ont été utilisées dans divers protocoles expérimentaux, notamment des études sur la signalisation cellulaire, la résistance aux médicaments, l’apoptose et le cycle cellulaire cancéreux. Ces cellules constituent également une ressource essentielle pour la production d’anticorps monoclonaux et pour la recherche sur la réponse immunitaire aux cellules du cancer du sein.

En résumé, la lignée cellulaire SK-BR-3 est un outil indispensable à la recherche sur le cancer du sein; elle offre des connaissances approfondies sur la biologie des tumeurs HER2-positives et facilite le développement de thérapies ciblées qui ont considérablement amélioré les perspectives des patients atteints de cette forme difficile de cancer.

Tissue
Sein, glande mammaire
Disease
Carcinome canalaire invasif
Metastatic site
Épanchement pleural
Synonyms
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Oui, chez les souris nues, il se développe un adénocarcinome peu différencié
Karyotype
(P9) hypertriploïde à hypotétraploïde (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) présentant des anomalies telles que des dicentriques, des fragments acrocentriques, des anneaux, des constrictions secondaires, de grands métacentriques ou polycentriques et un marqueur submétacentrique de grande taille
Doubling time
30 heures

04Identifiers

Citation
SK-BR-3 (numéro de catalogue Cytion 300333)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 positif
Antigen expression
Groupe sanguin A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, produit de la fréquence du phénotype : 0,0044
Mutational profile
mutation du gène TP53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w : 3,0 g/L de glucose, w : stable; glutamine, w : 2,0 mM de pyruvate de sodium, w : 2,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
Lancer la culture à partir d’un cryotube à une densité de 3 × 10⁴ cellules/cm². Utiliser une densité de 2 × 10⁴ cellules/cm² pour les sous-cultures suivantes.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
43 ans
Ethnicity
caucasien