Preskoči na vsebino
SK-BR-3
Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumenti

SK-BR-3

Cell line · Številka izdelka 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice SK-BR-3 so celična linija človeškega raka dojke, izolirana iz plevralnega izliva 43-letne bolnice z metastatskim rakom dojke. Celice SKBR3 so bile ustanovljene v začetku sedemdesetih let prejšnjega stoletja in so znane po prekomerni ekspresiji človeškega receptorja za epidermalni rastni dejavnik 2 (HER2), receptorske tirozinske kinaze, ki ima ključno vlogo pri patogenezi in napredovanju nekaterih vrst raka dojk.

Za to celično linijo so značilne genetske aberacije, ki so pogoste pri raku dojk, vključno z amplifikacijo gena HER2 in mutacijami v tumor supresorskem genu p53. Zaradi prekomernega izražanja HER2 v celicah SK-BR-3 so te dragocen model za preučevanje HER2-pozitivnega raka dojk, za katerega sta značilni agresivna rast in slaba prognoza, ter za zdravljenje, usmerjeno na HER2. Celice SK-BR-3 so bile ključne pri preučevanju trastuzumaba (Herceptin), monoklonskega protitelesa proti HER2, ki je postalo temelj zdravljenja HER2-pozitivnega raka dojk.

Celice SK-BR-3 imajo visoko stopnjo rasti in vitro in so bile uporabljene v različnih eksperimentalnih postavitvah, vključno s študijami celične signalizacije, odpornosti na zdravila, apoptoze in celičnega cikla raka. Te celice so tudi ključni vir za proizvodnjo monoklonskih protiteles in za raziskave imunskega odziva na celice raka dojke.

Če povzamemo, je celična linija SK-BR-3 nepogrešljivo orodje pri raziskavah raka dojk, saj omogoča globok vpogled v biologijo HER2-pozitivnih tumorjev in omogoča razvoj ciljanih terapij, ki so bistveno izboljšale možnosti za bolnike s to zahtevno obliko raka.

Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, pri golih miših tvori slabo diferenciran adenokarcinom
Kariotip
(P9) hipertriploidni do hipotraploidni (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) z nepravilnostmi, vključno z dicentriki, akrocentričnimi fragmenti, obroči, sekundarnimi zožitvami, velikimi metacentriki ali policentriki in velikimi submetacentričnimi označevalci
Čas podvojitve
30 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
SK-BR-3 (kataloška številka Cytion 300333)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 pozitiven
Ekspresija antigena
Krvna skupina A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Izoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0044
Profil mutacij
TP53 mut

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glukoze, w: stabilen glutamin, w: 2,0 mM natrijevega piruvata, w: 2,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820200a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
Začnite kultiviranje iz kriovialke pri 3 x 104 celicah/cm2. Za nadaljnje subkulture uporabite 2 x 104 celic/cm2.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
43 let
Etnična pripadnost
Kavkaški