Ga naar de inhoud
SK-BR-3
Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Documenten

SK-BR-3

Cell line · Productnummer 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

SK-BR-3 cellen zijn een menselijke borstkankercellijn geïsoleerd uit de pleurale effusie van een 43-jarige vrouwelijke patiënt met uitgezaaide borstkanker. SKBR3-cellen werden in het begin van de jaren zeventig gecreëerd en staan bekend om hun overexpressie van de humane epidermale groeifactorreceptor 2 (HER2), een receptortyrosinekinase dat een cruciale rol speelt in de pathogenese en progressie van bepaalde typen borstkanker.

De cellijn wordt gekenmerkt door genetische afwijkingen die veel voorkomen bij borstkanker, waaronder amplificatie van het HER2-gen en mutaties in het p53 tumorsuppressorgen. De overexpressie van HER2 in SK-BR-3 cellen maakt ze tot een waardevol model voor het bestuderen van HER2-positieve borstkanker, die wordt gekenmerkt door agressieve groei en een slechte prognose, en voor HER2-gerichte therapieën. SK-BR-3 cellen hebben een belangrijke rol gespeeld in het onderzoek naar trastuzumab (Herceptin), een monoklonaal antilichaam tegen HER2 dat een hoeksteen is geworden in de behandeling van HER2-positieve borstkanker.

SK-BR-3 cellen vertonen een robuuste in vitro groeisnelheid en zijn gebruikt in verschillende experimentele opstellingen, waaronder studies naar celsignalering, geneesmiddelenresistentie, apoptose en de kankercelcyclus. Deze cellen zijn ook een belangrijke bron voor de productie van monoklonale antilichamen en voor onderzoek naar de immuunrespons op borstkankercellen.

Samengevat is de SK-BR-3 cellijn een onmisbaar instrument in borstkankeronderzoek, dat diepgaande inzichten biedt in de biologie van HER2-positieve tumoren en de ontwikkeling mogelijk maakt van doelgerichte therapieën die de vooruitzichten voor patiënten met deze uitdagende vorm van kanker aanzienlijk hebben verbeterd.

Weefsel
Borst, borstklier
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen, vormt slecht gedifferentieerd adenocarcinoom
Karyotype
(P9) hypertriploïd tot hypotetraploïd (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) met afwijkingen waaronder dicentrische, acrocentrische fragmenten, ringen, secundaire vernauwingen, grote metacentrische of polycentrische en grote submetacentrische marker
Verdubbelingstijd
30 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SK-BR-3 (Cytion catalogusnummer 300333)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53-positief
Antigeenexpressie
Bloedgroep A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Iso-enzymen
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotype Frequentie Product: 0.0044
Mutatieprofiel
TP53 mutatie

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiel Glutamine, w: 2,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
Start de kweek vanuit cryovial bij 3 x 104 cellen/cm2. Gebruik 2 x 104 cellen/cm2 voor verdere subculturen.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
43 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch