Skip to content
SK-BR-3
Tissue
שד, בלוטת חלב
Disease
קרצינומה דוקטלית פולשנית
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Documents

SK-BR-3

Cell line · Product number 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי SK-BR-3 הם קו תאים של סרטן השד האנושי, המבודדים מהצטברות נוזלים בחלל הצדר של חולה בת 43 הסובלת מסרטן השד גרורתי. תאי SKBR3 הוקמו בתחילת שנות ה-70 והם ידועים בביטוי יתר של קולטן גורם הגדילה האפידרמלי האנושי 2 (HER2), קולטן טירוזין קינאז הממלא תפקיד קריטי בפתוגנזה ובהתקדמות של סוגים מסוימים של סרטן השד.

קו התאים מאופיין בחריגות גנטיות נפוצות בסרטן השד, כולל הגברה של הגן HER2 ומוטציות בגן p53 המדכא גידולים. הביטוי-היתר של HER2 בתאי SK-BR-3 הופך אותם למודל חשוב לחקר סרטן השד HER2-חיובי, המאופיין בצמיחה אגרסיבית ובפרוגנוזה גרועה, ולטיפולים המכוונים ל-HER2. תאי SK-BR-3 שימשו ככלי חשוב במחקר על טראסטוזומאב (Herceptin), נוגדן מונוקלונלי נגד HER2 שהפך לאבן יסוד בטיפול בסרטן השד HER2-חיובי.

תאי SK-BR-3 מציגים קצב גדילה חזק במבחנה ושימשו במגוון מערכי ניסוי, כולל מחקרים על איתות תאי, עמידות לתרופות, אפופטוזיס ומחזור התא הסרטני. תאים אלה הם גם משאב מרכזי לייצור נוגדנים מונוקלונליים ולמחקר על התגובה החיסונית לתאי סרטן השד.

לסיכום, קו התאים SK-BR-3 הוא כלי חיוני במחקר סרטן השד, המספק תובנות מעמיקות על הביולוגיה של גידולים חיוביים ל-HER2 ומקל על פיתוח טיפולים ממוקדים, אשר שיפרו באופן משמעותי את התחזית לחולים הסובלים מצורה מאתגרת זו של סרטן.

Tissue
שד, בלוטת חלב
Disease
קרצינומה דוקטלית פולשנית
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים, צורות אדנוקרצינומה מובחנות גרוע
Karyotype
(P9) היפרטריפלואידי עד היפוטטרהפלואידי (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) עם חריגות הכוללות דיצנטרים, שברי אקרוצנטרים, טבעות, היצרויות משניות, מטצנטרים גדולים או פוליצנטרים וסימן תת-מטצנטרי גדול
Doubling time
30 שעות

04Identifiers

Citation
SK-BR-3 (מספר קטלוגי Cytion 300333)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 חיובי
Antigen expression
סוג דם A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0044
Mutational profile
מוטציה TP53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
התחל את התרבית מהקריוביאול ב-3 x 104 תאים/סמ"ר. השתמש ב-2 x 104 תאים/סמ"ר להמשך תרבית משנה.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
43 שנים
Ethnicity
קווקזי