Премини към съдържанието
SK-BR-3
Тъкан
Гърди, млечна жлеза
Заболяване
Инвазивен дуктален карцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Документи

SK-BR-3

Cell line · Номер на продукта 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките SK-BR-3 са човешка клетъчна линия за рак на гърдата, изолирана от плевралния излив на 43-годишна пациентка с метастатичен рак на гърдата. Клетките SKBR3 са създадени в началото на 70-те години на миналия век и са известни със своята свръхекспресия на човешкия рецептор за епидермален растежен фактор 2 (HER2) - рецепторна тирозин киназа, която играе решаваща роля в патогенезата и прогресията на някои видове рак на гърдата.

Клетъчната линия се характеризира с генетични аберации, характерни за рака на гърдата, включително амплификация на гена HER2 и мутации в туморния супресорен ген p53. Свръхекспресията на HER2 в клетките SK-BR-3 ги превръща в ценен модел за изследване на HER2-позитивния рак на гърдата, който се характеризира с агресивен растеж и лоша прогноза, както и за HER2-таргетирани терапии. Клетките SK-BR-3 са от съществено значение за изследването на трастузумаб (Herceptin), моноклонално антитяло срещу HER2, което се превърна в крайъгълен камък в лечението на HER2-положителен рак на гърдата.

Клетките SK-BR-3 се характеризират със стабилен растеж in vitro и са използвани в различни експериментални постановки, включително изследвания на клетъчната сигнализация, лекарствената резистентност, апоптозата и клетъчния цикъл на рака. Тези клетки са също така ключов ресурс за производството на моноклонални антитела и за изследвания на имунния отговор към клетките на рака на гърдата.

В обобщение, клетъчната линия SK-BR-3 е незаменим инструмент в изследванията на рака на гърдата, предлагащ задълбочени познания за биологията на HER2-позитивните тумори и улесняващ разработването на целеви терапии, които значително подобриха перспективите за пациентите с тази предизвикателна форма на рак.

Тъкан
Гърди, млечна жлеза
Заболяване
Инвазивен дуктален карцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки образува слабо диференциран аденокарцином
Кариотип
(P9) хипертриплоидни до хипотетраплоидни (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) с аномалии, включващи дицентрици, акроцентрични фрагменти, пръстени, вторични стеснения, големи метацентрици или полицентрици и голям субметацентричен маркер
Време за удвояване
30 часа

04Идентификатори

Източник
SK-BR-3 (каталожен номер 300333 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0033

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
P53 положителен
Експресия на антигена
Кръвна група А, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Изоензими
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Фенотип Честота на продукта: 0.0044
Мутационен профил
Мутация на TP53

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
McCoys 5a, w: 3,0 g/L глюкоза, w: стабилен глутамин, w: 2,0 mM натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820200a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Започнете култивирането от криовиал при 3 x 104 клетки/cm2. Използвайте 2 x 104 клетки/cm2 за продължителни субкултури.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
43 години
Етническа принадлежност
Кавказки