Przejdź do treści
SK-BR-3
Chusteczka
Piersi, gruczoł sutkowy
Choroba
Inwazyjny rak przewodowy
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumenty

SK-BR-3

Cell line · Numer produktu 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki SK-BR-3 to ludzka linia komórkowa raka piersi wyizolowana z wysięku opłucnowego 43-letniej pacjentki z przerzutowym rakiem piersi. Komórki SKBR3 powstały we wczesnych latach 70. i są znane z nadekspresji receptora 2 ludzkiego naskórkowego czynnika wzrostu (HER2), receptorowej kinazy tyrozynowej, która odgrywa kluczową rolę w patogenezie i progresji niektórych typów raka piersi.

Linia komórkowa charakteryzuje się aberracjami genetycznymi powszechnymi w raku piersi, w tym amplifikacją genu HER2 i mutacjami w genie supresorowym nowotworu p53. Nadekspresja HER2 w komórkach SK-BR-3 czyni je cennym modelem do badania HER2-dodatniego raka piersi, który charakteryzuje się agresywnym wzrostem i złym rokowaniem, a także do terapii ukierunkowanych na HER2. Komórki SK-BR-3 odegrały kluczową rolę w badaniu trastuzumabu (Herceptin), przeciwciała monoklonalnego przeciwko HER2, które stało się kamieniem węgielnym w leczeniu HER2-dodatniego raka piersi.

Komórki SK-BR-3 wykazują silny wzrost in vitro i były wykorzystywane w różnych konfiguracjach eksperymentalnych, w tym w badaniach nad sygnalizacją komórkową, opornością na leki, apoptozą i cyklem komórkowym raka. Komórki te są również kluczowym źródłem do produkcji przeciwciał monoklonalnych i badań nad odpowiedzią immunologiczną na komórki raka piersi.

Podsumowując, linia komórkowa SK-BR-3 jest niezbędnym narzędziem w badaniach nad rakiem piersi, oferując głęboki wgląd w biologię guzów HER2-dodatnich i ułatwiając rozwój terapii celowanych, które znacznie poprawiły perspektywy dla pacjentów z tą trudną postacią raka.

Chusteczka
Piersi, gruczoł sutkowy
Choroba
Inwazyjny rak przewodowy
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy tworzy słabo zróżnicowanego gruczolakoraka
Karyotyp
(P9) hipertriploidalne do hipotetraploidalnych (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) z nieprawidłowościami obejmującymi dicentryki, fragmenty akrocentryczne, pierścienie, wtórne zwężenia, duże metacentryki lub policentryki i duży marker submetacentryczny
Czas podwojenia
30 godzin

04Identyfikatory

Źródło
SK-BR-3 (numer katalogowy Cytion 300333)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
P53 dodatni
Ekspresja antygenu
Grupa krwi A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Izoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, produkt częstotliwości fenotypu: 0.0044
Profil mutacji
TP53 mut

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukozy, w: stabilna glutamina, w: 2,0 mM pirogronianu sodu, w: 2,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820200a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Rozpocznij hodowlę z krioprobówki przy gęstości 3 x 104 komórek/cm2. Do dalszych subkultur użyj gęstości 2 x 104 komórek/cm2.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
43 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski