Gå direkte til indholdet
SK-BR-3
Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumenter

SK-BR-3

Cell line · Varenummer 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

SK-BR-3-celler er en human brystkræftcellelinje, der blev isoleret fra pleuraeffusionen fra en 43-årig kvindelig patient med metastatisk brystkræft. SKBR3-celler blev etableret i begyndelsen af 1970'erne og er kendt for deres overudtryk af den humane epidermale vækstfaktorreceptor 2 (HER2), en receptortyrosinkinase, der spiller en kritisk rolle i patogenesen og udviklingen af visse typer brystkræft.

Cellelinjen er karakteriseret ved genetiske aberrationer, der er almindelige ved brystkræft, herunder amplifikation af HER2-genet og mutationer i p53-tumorsuppressorgenet. Overekspressionen af HER2 i SK-BR-3-celler gør dem til en værdifuld model til undersøgelse af HER2-positiv brystkræft, som er kendetegnet ved aggressiv vækst og en dårlig prognose, og til HER2-målrettede terapier. SK-BR-3-celler har været afgørende i undersøgelsen af trastuzumab (Herceptin), et monoklonalt antistof mod HER2, som er blevet en hjørnesten i behandlingen af HER2-positiv brystkræft.

SK-BR-3-celler udviser en robust in vitro-vækst og er blevet brugt i en række forskellige forsøgsopstillinger, herunder undersøgelser af cellesignalering, lægemiddelresistens, apoptose og kræftcellecyklus. Disse celler er også en vigtig ressource til produktion af monoklonale antistoffer og til forskning i immunresponsen på brystkræftceller.

Kort sagt er SK-BR-3-cellelinjen et uundværligt værktøj i brystkræftforskningen, der giver dyb indsigt i HER2-positive tumorers biologi og letter udviklingen af målrettede behandlinger, der har forbedret udsigterne for patienter med denne udfordrende form for kræft betydeligt.

Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgenmus, danner dårligt differentieret adenokarcinom
Karyotype
(P9) hypertriploid til hypotetraploid (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) med abnormiteter, herunder dicentriske, acrocentriske fragmenter, ringe, sekundære indsnævringer, store metacentriske eller polycentriske og store submetacentriske markører
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-BR-3 (Cytion katalognummer 300333)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53-positiv
Antigenudtryk
Blodtype A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0044
Mutationsprofil
TP53 mut

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukose, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
Start dyrkningen fra kryorør med 3 x 104 celler/cm2. Brug 2 x 104 celler/cm2 til fortsatte subkulturer.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
43 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk