- Tissue
- 乳房、乳腺
- Disease
- 侵襲性導管癌
- Metastatic site
- 胸腔積液
- Synonyms
- SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3
Documents
SK-BR-3
Cell line · Product number 300333
SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...
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01General information
- Description
SK-BR-3 細胞是一種從一名 43 歲女性轉移性乳癌患者的胸腔積液中分離出來的人類乳癌細胞系。 SK-BR-3 細胞於 1970 年代初期建立，以其過度表達人類表皮生長因子受體 2（HER2）而聞名；HER2 是一種受體酪胺酸激酶，在某些類型乳癌的病理機制與進展中扮演關鍵角色。
該細胞系的特徵在於具有乳腺癌中常見的遺傳異常，包括 HER2 基因的擴增以及 p53 腫瘤抑制基因的突變。 SK-BR-3 細胞中 HER2 的過度表達，使其成為研究 HER2 陽性乳癌（其特徵為生長兇猛且預後不良）以及 HER2 標靶治療的寶貴模型。 SK-BR-3 細胞在研究曲妥珠單抗（Herceptin）方面發揮了關鍵作用，這種針對 HER2 的單克隆抗體已成為治療 HER2 陽性乳癌的基石。
SK-BR-3 細胞展現出強勁的體外生長速率，並已被應用於多種實驗設計中，包括細胞訊號傳導、藥物抗性、細胞凋亡以及癌細胞週期的研究。這些細胞也是生產單克隆抗體以及研究對乳癌細胞免疫反應的重要資源。
總而言之，SK-BR-3 細胞系是乳癌研究中不可或缺的工具，不僅能深入揭示 HER2 陽性腫瘤的生物學特性，更促進了標靶治療的開發，顯著改善了罹患這種棘手癌症患者的預後。
- Tissue
- 乳房、乳腺
- Disease
- 侵襲性導管癌
- Metastatic site
- 胸腔積液
- Synonyms
- SK-Br-3
- Sk-Br-3
- SK BR 03
- SKBR-3
- SKBr-3
- SK-BR3
- SKBr3
- SkBr3
- SKBR3
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的，在裸鼠身上，會形成分化程度較低的腺癌
- Karyotype
- (P9) 超三倍體至低四倍體 (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D)，異常特徵包括雙著絲點染色體、端著絲點碎片、環狀染色體、次級狹窄、大型中著絲點染色體或多著絲點染色體，以及大型次中著絲點標記
- Doubling time
- 30 小時
04Identifiers
- Citation
- SK-BR-3（Cytion 型號 300333）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0033
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 陽性
- Antigen expression
- A型血，Rh陽性，HLA A11，Bw22（+/-），B40，B18
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, 表型頻率積：0.0044
- Mutational profile
- TP53 突變
06Handling and culture
- Culture medium
- 麥考伊 5a 培養基，含：3.0 g/L 葡萄糖，含：穩定型谷氨酰胺，含：2.0 mM 丙酮酸鈉，含：2.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820200a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 從冷凍管中取細胞進行培養，密度為 3 × 10⁴ 個細胞/cm²。後續傳代培養時，密度為 2 × 10⁴ 個細胞/cm²。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 43年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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