Μετάβαση στο περιεχόμενο
SK-BR-3
Ιστός
Μαστός, μαστικός αδένας
Ασθένεια
Διηθητικό καρκίνωμα του πόρου
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Έγγραφα

SK-BR-3

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα SK-BR-3 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του μαστού που απομονώθηκε από την υπεζωκοτική συλλογή μιας 43χρονης ασθενούς με μεταστατικό καρκίνο του μαστού. Τα κύτταρα SKBR3 δημιουργήθηκαν στις αρχές της δεκαετίας του 1970 και είναι γνωστά για την υπερέκφραση του υποδοχέα 2 του ανθρώπινου επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (HER2), μιας κινάσης του υποδοχέα τυροσίνης που διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στην παθογένεια και την εξέλιξη ορισμένων τύπων καρκίνου του μαστού.

Η κυτταρική σειρά χαρακτηρίζεται από γενετικές ανωμαλίες που είναι κοινές στον καρκίνο του μαστού, συμπεριλαμβανομένης της ενίσχυσης του γονιδίου HER2 και μεταλλάξεων στο ογκοκατασταλτικό γονίδιο p53. Η υπερέκφραση του HER2 στα κύτταρα SK-BR-3 τα καθιστά πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη του HER2-θετικού καρκίνου του μαστού, ο οποίος χαρακτηρίζεται από επιθετική ανάπτυξη και κακή πρόγνωση, καθώς και για θεραπείες που στοχεύουν στο HER2. Τα κύτταρα SK-BR-3 έχουν παίξει καθοριστικό ρόλο στη μελέτη της τραστουζουμάμπης (Herceptin), ενός μονοκλωνικού αντισώματος κατά του HER2 που έχει καταστεί ακρογωνιαίος λίθος στη θεραπεία του HER2-θετικού καρκίνου του μαστού.

Τα κύτταρα SK-BR-3 παρουσιάζουν ισχυρό ρυθμό ανάπτυξης in vitro και έχουν χρησιμοποιηθεί σε ποικίλες πειραματικές διατάξεις, συμπεριλαμβανομένων μελετών σχετικά με την κυτταρική σηματοδότηση, την αντίσταση στα φάρμακα, την απόπτωση και τον καρκινικό κυτταρικό κύκλο. Τα κύτταρα αυτά αποτελούν επίσης βασική πηγή για την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων και για την έρευνα της ανοσολογικής απόκρισης στα κύτταρα καρκίνου του μαστού.

Συνοπτικά, η κυτταρική σειρά SK-BR-3 είναι ένα απαραίτητο εργαλείο στην έρευνα για τον καρκίνο του μαστού, προσφέροντας βαθιά γνώση της βιολογίας των HER2-θετικών όγκων και διευκολύνοντας την ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών που έχουν βελτιώσει σημαντικά τις προοπτικές των ασθενών με αυτή τη δύσκολη μορφή καρκίνου.

Ιστός
Μαστός, μαστικός αδένας
Ασθένεια
Διηθητικό καρκίνωμα του πόρου
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια, σχηματίζει φτωχά διαφοροποιημένο αδενοκαρκίνωμα
Καρυότυπος
(P9) υπερτριπλοειδής έως υποτετραπλοειδής (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) με ανωμαλίες που περιλαμβάνουν δικεντρικά, ακροκεντρικά θραύσματα, δακτυλίους, δευτερογενείς στενώσεις, μεγάλα μετακεντρικά ή πολυκεντρικά και μεγάλο υπομετακεντρικό δείκτη
Χρόνος διπλασιασμού
30 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
SK-BR-3 (αριθμός καταλόγου Cytion 300333)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0033

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
P53 θετικό
Έκφραση αντιγόνου
Ομάδα αίματος A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Ισοένζυμα
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Προϊόν συχνότητας φαινοτύπου: 0.0044
Προφίλ μεταλλάξεων
TP53 mut

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
McCoys 5a, w: 3,0 g/L γλυκόζη, w: σταθερή γλουταμίνη, w: 2,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 2,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820200a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
Ξεκινήστε την καλλιέργεια από κρυοφιαλίδα με 3 x 104 κύτταρα/cm2. Χρησιμοποιήστε 2 x 104 κύτταρα/cm2 για συνεχιζόμενες υποκαλλιέργειες.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
43 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος