Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα SK-MEL-5
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Μελάνωμα
Θέση μετάστασης
Μασχαλιαίος λεμφαδένας
Συνώνυμα
SK-Mel-5, SK MEL 5, SK.MEL.5, SK-MEL5, SKMel-5, SKMEL-5, SKMEL5, SKMel5, SKmel5, AA-Mel

Έγγραφα

Κύτταρα SK-MEL-5

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300157

Πρόκειται για μία από τις πολλές σειρές κυτταρικών σειρών μελανώματος που έχουν απομονωθεί από τον T. Takahashi και τους συνεργάτες του. Οι σειρές αυτές χρησίμευσαν ως πηγή κυττάρων-στόχων ...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Πρόκειται για μία από τις πολύ εκτεταμένες σειρές γραμμών μελανώματος που έχουν απομονωθεί από τον T. Takahashi και τους συνεργάτες του. Οι σειρές αυτές χρησίμευσαν ως πηγή κυττάρων-στόχων για την ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων για το μελάνωμα σε ασθενείς με αυτή τη νόσο.
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Μελάνωμα
Θέση μετάστασης
Μασχαλιαίος λεμφαδένας
Εφαρμογές
Έρευνα για το μελάνωμα· βιολογία του καρκίνου του δέρματος· ευαισθησία του μελανώματος στα φάρμακα· αξιολόγηση αναστολέων σημείων ελέγχου· μελέτες της οδού MAPK/ERK· κυτταρική μετανάστευση και εισβολή· μοντέλα ξενομοσχεύματος· δοκιμασίες κυτταροτοξικότητας των κυττάρων NK και των Τ-κυττάρων (κύτταρα-στόχοι)
Συνώνυμα
  • SK-Mel-5
  • SK MEL 5
  • SK.MEL.5
  • SK-MEL5
  • SKMel-5
  • SKMEL-5
  • SKMEL5
  • SKMel5
  • SKmel5
  • AA-Mel

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; wildtype melanoma cell line isolated by T. Takahashi et al.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Stellate
Τύπος κυττάρου
Μελανοκύτταρα/κύτταρα μελανώματος
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια, σχηματίζει κακοήθες μελάνωμα
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24 έως 36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
SK-MEL-5 (αριθμός καταλόγου Cytion 300157)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0527

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
P53 θετικό
Ισοένζυμα
PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Προϊόν συχνότητας φαινοτύπου: 0.0860
Προϊόντα
Μελανίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
24 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος