Přejít na obsah
SK-BR-3
Tkáň
Prsa, mléčná žláza
Nemoc
Invazivní duktální karcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Dokumenty

SK-BR-3

Cell line · Číslo výrobku 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky SK-BR-3 jsou lidskou buněčnou linií karcinomu prsu izolovanou z pleurálního výpotku 43leté pacientky s metastazujícím karcinomem prsu. Buňky SKBR3 byly vytvořeny na počátku 70. let 20. století a jsou známé svou nadměrnou expresí lidského receptoru pro epidermální růstový faktor 2 (HER2), receptorové tyrozinkinázy, která hraje klíčovou roli v patogenezi a progresi některých typů karcinomu prsu.

Tato buněčná linie se vyznačuje genetickými aberacemi běžnými u rakoviny prsu, včetně amplifikace genu HER2 a mutací v nádorovém supresorovém genu p53. Nadměrná exprese HER2 v buňkách SK-BR-3 z nich činí cenný model pro studium HER2-pozitivního karcinomu prsu, který se vyznačuje agresivním růstem a špatnou prognózou, a pro terapie cílené na HER2. Buňky SK-BR-3 byly důležité při studiu trastuzumabu (Herceptin), monoklonální protilátky proti HER2, která se stala základem léčby HER2 pozitivního karcinomu prsu.

Buňky SK-BR-3 vykazují robustní růst in vitro a byly použity v různých experimentálních sestavách, včetně studií buněčné signalizace, rezistence vůči lékům, apoptózy a buněčného cyklu rakoviny. Tyto buňky jsou také klíčovým zdrojem pro výrobu monoklonálních protilátek a pro výzkum imunitní odpovědi na buňky rakoviny prsu.

Lze shrnout, že buněčná linie SK-BR-3 je nepostradatelným nástrojem ve výzkumu rakoviny prsu, který nabízí hluboký vhled do biologie HER2-pozitivních nádorů a usnadňuje vývoj cílených terapií, které výrazně zlepšily vyhlídky pacientů s touto náročnou formou rakoviny.

Tkáň
Prsa, mléčná žláza
Nemoc
Invazivní duktální karcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší vytváří špatně diferencovaný adenokarcinom
Karyotyp
(P9) hypertriploidní až hypotetraploidní (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) s abnormalitami včetně dicentrik, akrocentrických fragmentů, kroužků, sekundárních zúžení, velkých metacentrik nebo polycentrik a velkých submetacentrických markerů
Doba zdvojnásobení
30 hodin

04Identifikátory

Citace
SK-BR-3 (katalogové číslo Cytion 300333)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 pozitivní
Exprese antigenu
Krevní skupina A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyp Frekvence produktu: 0.0044
Mutační profil
Mutace TP53

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilní glutamin, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Začněte kultivaci z kryovialky při 3 x 104 buňkách/cm2. Pro pokračující subkultivace použijte 2 x 104 buněk/cm2.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
43 let
Etnická příslušnost
Kavkazský