الانتقال إلى المحتوى
SK-BR-3
الأنسجة
الثدي، الغدة الثديية
المرض
سرطان الأقنية القنوي الغازي
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

المستندات

SK-BR-3

Cell line · رقم المنتج 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا SK-BR-3 هي سلالة خلايا سرطان الثدي البشرية المعزولة من الانصباب الجنبي لمريضة تبلغ من العمر 43 عاماً مصابة بسرطان الثدي النقيلي. أُنشئت خلايا SKBR3 في أوائل السبعينيات من القرن الماضي وهي معروفة بإفراطها في التعبير عن مستقبل عامل نمو البشرة البشري 2 (HER2)، وهو مستقبل تيروزين كيناز يلعب دوراً حاسماً في التسبب في الإصابة بأنواع معينة من سرطان الثدي وتطورها.

يتميز خط الخلية بالانحرافات الجينية الشائعة في سرطان الثدي، بما في ذلك تضخيم جين HER2 والطفرات في الجين الكابت للورم p53. إن الإفراط في تضخيم الجين HER2 في خلايا SK-BR-3 يجعلها نموذجاً قيماً لدراسة سرطان الثدي الإيجابي للجين HER2، والذي يتميز بنمو عدواني وسوء التشخيص، وللعلاجات التي تستهدف HER2. كان لخلايا SK-BR-3 دور فعال في دراسة تراستوزوماب (هيرسيبتين)، وهو جسم مضاد أحادي النسيلة ضد HER2 الذي أصبح حجر الزاوية في علاج سرطان الثدي الإيجابي لـ HER2.

تُظهر خلايا SK-BR-3 معدل نمو قوي في المختبر وقد استُخدمت في مجموعة متنوعة من الإعدادات التجريبية، بما في ذلك دراسات حول إشارات الخلايا ومقاومة الأدوية وموت الخلايا المبرمج ودورة الخلية السرطانية. وتُعد هذه الخلايا أيضاً مورداً رئيسياً لإنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة وللبحث في الاستجابة المناعية لخلايا سرطان الثدي.

وباختصار، يعتبر خط خلايا SK-BR-3 أداة لا غنى عنها في أبحاث سرطان الثدي، حيث يقدم رؤى عميقة في بيولوجيا الأورام الإيجابية للورم HER2 ويسهل تطوير علاجات مستهدفة حسّنت بشكل كبير من التوقعات بالنسبة للمرضى الذين يعانون من هذا النوع الصعب من السرطان.

الأنسجة
الثدي، الغدة الثديية
المرض
سرطان الأقنية القنوي الغازي
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية، تشكل سرطان غدي ضعيف التمايز
النمط الكروموسومي
(P9) مفرطة الصبغيات إلى ناقصة الصبغيات (+A، +B، +C، +E، +F، +G، -D) مع وجود تشوهات تشمل ثنائية المركز، وشظايا ثنائية المركز، وشظايا متحدة المركز، وحلقات، وتضيقات ثانوية، ومركبات ميترو كبيرة أو متعددة المراكز، وعلامة كبيرة تحت المركز
زمن المضاعفة
30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
SK-BR-3 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300333)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0033

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
P53 إيجابي
التعبير عن المستضد
فصيلة الدم A، وريزوس +، وHLA A11، وBw22(+/-)، وB40، وB18
الإيزوزيمات
PGM3، 1، PGM1، 1-2، ES-D، 1، AK-1، 1-2، GLO-1، 2، G6PD، B، منتج تردد النمط الظاهري: 0.0044
الأنماط الطفريّة
طفرة TP53

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
ابدأ الزراعة من أنبوب التخزين المبرد عند 3 × 104 خلية/سم2. استخدم 2 × 104 خلية/سم2 لمواصلة الزراعة الفرعية.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
43 سنة
الأصل العرقي
قوقازي