Skip to content
SK-BR-3
Tissue
เต้านม, ต่อมน้ำนม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Documents

SK-BR-3

Cell line · Product number 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ SK-BR-3 เป็นเซลล์มะเร็งเต้านมของมนุษย์ที่แยกได้จากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดของผู้ป่วยหญิงอายุ 43 ปีที่เป็นมะเร็งเต้านมระยะแพร่กระจาย เซลล์ SKBR3 ถูกสร้างขึ้นในช่วงต้นทศวรรษ 1970 และเป็นที่รู้จักจากการแสดงออกมากเกินไปของตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังของมนุษย์ชนิดที่ 2 (HER2) ซึ่งเป็นไทโรซีนไคเนสตัวรับที่มีบทบาทสำคัญในการเกิดโรคและการลุกลามของมะเร็งเต้านมบางชนิด

สายเซลล์นี้มีลักษณะเฉพาะโดยความผิดปกติทางพันธุกรรมที่พบบ่อยในมะเร็งเต้านม รวมถึงการเพิ่มจำนวนของยีน HER2 และการกลายพันธุ์ในยีน p53 ซึ่งเป็นยีนกดการเจริญเติบโตของเนื้องอกการมี HER2 มากเกินไปในเซลล์ SK-BR-3 ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งเต้านมชนิด HER2-positive ซึ่งมีลักษณะการเจริญเติบโตที่รุนแรงและมีการพยากรณ์โรคที่ไม่ดี และสำหรับการรักษาที่มุ่งเป้าไปที่ HER2 เซลล์ SK-BR-3 มีบทบาทสำคัญในการศึกษาเกี่ยวกับทราสทูซูแมบ (Herceptin) ซึ่งเป็นแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอลที่ต่อต้าน HER2 และได้กลายเป็นหลักสำคัญในการรักษามะเร็งเต้านมชนิด HER2-positive

เซลล์ SK-BR-3 แสดงอัตราการเจริญเติบโตในหลอดทดลองที่แข็งแกร่ง และถูกนำมาใช้ในงานวิจัยหลากหลายรูปแบบ รวมถึงการศึกษาเกี่ยวกับการส่งสัญญาณของเซลล์ การดื้อยา การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และวัฏจักรของเซลล์มะเร็ง เซลล์เหล่านี้ยังเป็นทรัพยากรสำคัญสำหรับการผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล และการวิจัยเกี่ยวกับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันต่อเซลล์มะเร็งเต้านม

โดยสรุปแล้ว สายเซลล์ SK-BR-3 เป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้ในการวิจัยมะเร็งเต้านม โดยให้ข้อมูลเชิงลึกอันล้ำค่าเกี่ยวกับชีววิทยาของเนื้องอกที่มี HER2 เป็นบวก และช่วยอำนวยความสะดวกในการพัฒนายารักษาแบบมุ่งเป้าซึ่งได้ปรับปรุงการพยากรณ์โรคของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งเต้านมชนิดที่ท้าทายนี้อย่างมีนัยสำคัญ

Tissue
เต้านม, ต่อมน้ำนม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน พบรูปแบบของอะดีโนคาร์ซิโนมาที่มีการแยกตัวไม่ดี
Karyotype
(P9) ไฮเปอร์ทริปพลอยด์ถึงไฮโปเตตระพลอยด์ (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) พร้อมความผิดปกติรวมถึงไดเซนทริก, ชิ้นส่วนอะโครเซนทริก, วงแหวน, การบีบตัวรอง, เมตาเซนทริกขนาดใหญ่หรือพอลีเซนทริก และเครื่องหมายซับเมตาเซนทริกขนาดใหญ่
Doubling time
30 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
SK-BR-3 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300333)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 เป็นบวก
Antigen expression
กรุ๊ปเลือด A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, ความถี่ของฟีโนไทป์ ผลิตภัณฑ์: 0.0044
Mutational profile
การกลายพันธุ์ของ TP53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
เริ่มเพาะเลี้ยงจากหลอดแช่แข็งที่ความหนาแน่น 3 x 104 เซลล์/ซม. ใช้ 2 x 104 เซลล์/ซม. สำหรับการเพาะเลี้ยงต่อเนื่อง
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
43 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน