Skip to content
SK-BR-3
Tissue
Vú, tuyến vú
Disease
Ung thư ống dẫn xâm lấn
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
SK-Br-3, Sk-Br-3, SK BR 03, SKBR-3, SKBr-3, SK-BR3, SKBr3, SkBr3, SKBR3

Documents

SK-BR-3

Cell line · Product number 300333

SK-BR-3 cells are a human breast cancer cell line isolated from the pleural effusion of a 43-year-old female patient with metastatic breast cancer. SKBR3 ...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào SK-BR-3 là dòng tế bào ung thư vú người được phân lập từ dịch màng phổi của một bệnh nhân nữ 43 tuổi mắc ung thư vú di căn. Dòng tế bào SKBR3 được thiết lập vào đầu những năm 1970 và nổi tiếng với sự biểu hiện quá mức của thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì người 2 (HER2), một thụ thể tyrosine kinase đóng vai trò quan trọng trong cơ chế bệnh sinh và tiến triển của một số loại ung thư vú.

Dòng tế bào này có các biến đổi di truyền thường gặp trong ung thư vú, bao gồm sự nhân đôi gen HER2 và đột biến trong gen ức chế khối u p53. Sự biểu hiện quá mức của HER2 trong tế bào SK-BR-3 khiến chúng trở thành mô hình quý giá để nghiên cứu ung thư vú dương tính với HER2, đặc trưng bởi sự phát triển ác tính và tiên lượng xấu, cũng như các liệu pháp nhắm mục tiêu HER2. Tế bào SK-BR-3 đã đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu trastuzumab (Herceptin), một kháng thể đơn dòng chống HER2 đã trở thành nền tảng trong điều trị ung thư vú dương tính với HER2.

Tế bào SK-BR-3 có tốc độ phát triển in vitro mạnh mẽ và đã được sử dụng trong nhiều thiết lập thí nghiệm, bao gồm nghiên cứu về tín hiệu tế bào, kháng thuốc, apoptosis và chu kỳ tế bào ung thư. Các tế bào này cũng là nguồn tài nguyên quan trọng cho sản xuất kháng thể đơn dòng và nghiên cứu về phản ứng miễn dịch đối với tế bào ung thư vú.

Tóm lại, dòng tế bào SK-BR-3 là công cụ không thể thiếu trong nghiên cứu ung thư vú, cung cấp những hiểu biết sâu sắc về sinh học của các khối u dương tính với HER2 và thúc đẩy sự phát triển của các liệu pháp nhắm mục tiêu, đã cải thiện đáng kể tiên lượng cho bệnh nhân mắc dạng ung thư vú phức tạp này.

Tissue
Vú, tuyến vú
Disease
Ung thư ống dẫn xâm lấn
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
  • SK-Br-3
  • Sk-Br-3
  • SK BR 03
  • SKBR-3
  • SKBr-3
  • SK-BR3
  • SKBr3
  • SkBr3
  • SKBR3

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude, các dạng ung thư tuyến không biệt hóa
Karyotype
(P9) từ hypertriploid đến hypotetraploid (+A, +B, +C, +E, +F, +G, -D) với các bất thường bao gồm dicentrics, mảnh acrocentric, vòng, co thắt thứ cấp, metacentrics hoặc polycentrics lớn và dấu hiệu submetacentric lớn
Doubling time
30 giờ

04Identifiers

Citation
SK-BR-3 (Số catalog Cytion 300333)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0033

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 dương tính
Antigen expression
Nhóm máu A, Rh dương, HLA A11, Bw22 (+/-), B40, B18
Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Tần suất kiểu hình: 0,0044
Mutational profile
Biến đổi gen TP53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, chứa: 3,0 g/L glucose, chứa: glutamine ổn định, chứa: 2,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
Bắt đầu nuôi cấy từ ống cryovial với mật độ 3 x 10⁴ tế bào/cm². Sử dụng mật độ 2 x 10⁴ tế bào/cm² cho các lần nuôi cấy tiếp theo.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
43 năm
Ethnicity
Người da trắng