Mine otse sisu juurde
SK-MES-1
Kude
Kopsud
Haigus
Rakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Dokumendid

SK-MES-1

Cell line · Toote number 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-MES-1 on inimese kopsu lamerakk-kartsinoomi (LSQCC) rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt kopsuvähi uuringutes, eelkõige uuringutes, mis keskenduvad mitteväikerakk-kopsuvähi teisele kõige sagedasemale alatüübile. SK-MES-1 rakke iseloomustab kõrge mutatsioonimäär kasvaja supressorgeenis p53, mis on seotud nende resistentsusega apoptoosi ja mitmesuguste kemoteraapiate suhtes. See rakuliin on oluline mudel, mille abil saab hinnata uusi ravistrateegiaid kopsukelmekartsinoomi vastu, eriti ravimite puhul, mis on suunatud rakutsükli ja apoptootiliste radade vastu.

Uuringud SK-MES-1-ga on näidanud, et rakuliin reageerib plaatinapõhistele kemoteraapia ainetele, nagu lobaplatiin, mis indutseerivad apoptoosi nii intrinsilise kui ka ekstrinsilise tee kaudu. On näidatud, et lobaplatiin, kolmanda põlvkonna plaatinaühend, pärsib SK-MES-1 proliferatsiooni, indutseerides S-faasi rakutsükli peatumist ja soodustades apoptoosi pro-apoptootiliste valkude, nagu Bax, ülereguleerimise ja antiapoptootiliste valkude, nagu Bcl-2, allareguleerimise kaudu. Lisaks sellele täheldati lobaplatiiniga töödeldud SK-MES-1 rakkudes kaspaas-3, -8 ja -9 aktiveerumise suurenemist, mis toetab veelgi mitokondriaalse vahendatud apoptoosi osalust.

SK-MES-1 on kasutatud ka teiste ühendite, näiteks kostunoliidi, fütokemikaali, mõju uurimiseks, mis kutsub esile G1/S-faasi rakutsükli peatumise ja apoptoosi mitokondritest sõltuva tee kaudu. Costunoliidi ravi suurendab p53 ja Baxi ekspressiooni, vähendades samal ajal Bcl-2 taset ja häirides mitokondriaalse membraanipotentsiaali, mis kinnitab veelgi SK-MES-1 kasulikkust apoptoosiga seotud radade uurimisel kopsu koldekartsinoomil.

Kude
Kopsud
Haigus
Rakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Karyotüüp
Tüveline kromosoomide arv on hüpotriploidne, kusjuures 2S-komponent esineb 3,2% ulatuses. Enamikul S-metafaasidel oli ühiselt 17-20 markerkromosoomi. Normaalsed kromosoomid x, 13 ja 19 puudusid ning kromosoomid 2, 3, 14, 17 ja 20 olid üldiselt monosoomsed. Y-kromosoomi ei tuvastatud QM-värvimise abil.

04Tunnused

Viide
SK-MES-1 (Cytioni katalooginumber 300339)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 negatiivne
Isoensüümid
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0132

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
65 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia