Tartalomra ugrás
SK-MES-1
Szövet
Tüdő
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Dokumentumok

SK-MES-1

Cell line · Termékszám 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az SK-MES-1 egy humán tüdő laphámsejtes karcinóma (LSQCC) sejtvonal, amelyet széles körben használnak a tüdőrák kutatásában, különösen a nem kissejtes tüdőrák második leggyakoribb altípusára (NSCLC) összpontosító vizsgálatokban. Az SK-MES-1 sejteket a p53 tumorszupresszor gén magas mutációs aránya jellemzi, ami az apoptózissal és a különböző kemoterápiákkal szembeni rezisztenciájukban játszik szerepet. Ez a sejtvonal fontos modellként szolgál a tüdő laphámsejtes karcinóma elleni új terápiás stratégiák értékeléséhez, különösen a sejtciklus és az apoptotikus útvonalakat célzó gyógyszerek esetében.

Az SK-MES-1-gyel végzett vizsgálatok kimutatták, hogy a sejtvonal érzékeny a platinaalapú kemoterápiás szerekre, például a lobaplatinra, amelyek mind az intrinzikus, mind az extrinsic útvonalon keresztül apoptózist indukálnak. A lobaplatin, egy harmadik generációs platinavegyület, bizonyítottan gátolja az SK-MES-1 proliferációját azáltal, hogy S-fázisú sejtciklus-megállást indukál és elősegíti az apoptózist a pro-apoptotikus fehérjék, például a Bax felszabályozásán és az anti-apoptotikus fehérjék, például a Bcl-2 leszabályozásán keresztül. Emellett a lobaplatinnal kezelt SK-MES-1 sejtek a kaszpáz-3, -8 és -9 aktiváció növekedését mutatták, ami tovább erősíti a mitokondriumok által közvetített apoptózis részvételét.

Az SK-MES-1-et más vegyületek, például a costunolid, egy olyan fitokémiai anyag, amely mitokondrium-függő útvonalon keresztül G1/S fázisú sejtciklus-megállást és apoptózist indukál, hatásainak vizsgálatára is használták. A costunolid kezelés növeli a p53 és a Bax expresszióját, miközben csökkenti a Bcl-2 szintjét és megzavarja a mitokondriális membránpotenciált, ami tovább erősíti az SK-MES-1 hasznosságát a tüdő laphámrák apoptózissal kapcsolatos útvonalainak vizsgálatában.

Szövet
Tüdő
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kariotípus
A törzskromoszómaszám hipotriploid, a 2S komponens 3,2%-ban fordul elő. Tizenhét-20 marker kromoszóma volt közös a legtöbb S metafázisban. A normális x, 13 és 19 kromoszómák hiányoztak, a 2, 3, 14, 17 és 20 kromoszómák pedig általában monoszómák voltak. Az Y kromoszómát nem mutatták ki QM festéssel.

04Azonosítók

Hivatkozás
SK-MES-1 (Cytion katalógusszám: 300339)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
P53 negatív
Izoenzimek
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Fenotípus gyakorisági termék: 0.0132

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
65 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi