Siirry sisältöön
SK-MES-1
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Okasolusyöpä
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

Asiakirjat

SK-MES-1

Cell line · Tuotenumero 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SK-MES-1 on ihmisen keuhkojen levyepiteelisolusyöpäsolulinja (LSQCC), jota käytetään laajasti keuhkosyöpätutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, joissa keskitytään ei-pienisoluisen keuhkosyövän toiseksi yleisimpään alatyyppiin (NSCLC). SK-MES-1-soluille on ominaista kasvainsuppressorigeeni p53:n korkea mutaatioprosentti, joka vaikuttaa niiden vastustuskykyyn apoptoosille ja erilaisille kemoterapioille. Tämä solulinja toimii tärkeänä mallina arvioitaessa uusia terapeuttisia strategioita keuhkojen levyepiteelisyöpää vastaan, erityisesti lääkkeitä, jotka kohdistuvat solusykliin ja apoptoosireitteihin.

SK-MES-1:llä tehdyt tutkimukset ovat osoittaneet, että solulinja reagoi platinapohjaisiin kemoterapia-aineisiin, kuten lobaplatiiniin, joka indusoi apoptoosia sekä intrinsisten että ekstrinsisten reittien kautta. Lobaplatiinin, kolmannen sukupolven platinayhdisteen, on osoitettu estävän SK-MES-1:n proliferaatiota indusoimalla S-vaiheen solusyklin pysähtymisen ja edistämällä apoptoosia pro-apoptoottisten proteiinien, kuten Baxin, ylössäätelyn ja anti-apoptoottisten proteiinien, kuten Bcl-2:n, alasäätelyn kautta. Lisäksi lobaplatiinilla käsitellyissä SK-MES-1-soluissa havaittiin kaspaasi-3-, -8- ja -9-aktivaation lisääntymistä, mikä tukee mitokondriovälitteisen apoptoosin osuutta.

SK-MES-1-soluja on käytetty myös muiden yhdisteiden, kuten costunolidin, vaikutusten tutkimiseen, sillä se on fytokemikaali, joka aiheuttaa G1/S-vaiheen solusyklin pysähtymisen ja apoptoosin mitokondrioista riippuvaisen reitin kautta. Costunolide-hoito lisää p53:n ja Baxin ilmentymistä ja vähentää samalla Bcl-2:n tasoja ja häiritsee mitokondrioiden kalvopotentiaalia, mikä vahvistaa entisestään SK-MES-1:n käyttökelpoisuutta apoptoosiin liittyvien reittien tutkimisessa keuhkojen levyepiteelikarsinoomassa.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Okasolusyöpä
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Karyotyyppi
Kromosomien runkoluku on hypotriploidi, ja 2S-komponenttia on 3,2 prosenttia. Useimmissa S-metafaaseissa oli 17-20 merkkikromosomia. Normaalit x-, 13- ja 19-kromosomit puuttuivat, ja kromosomit 2, 3, 14, 17 ja 20 olivat yleensä monosomisia. Y-kromosomia ei havaittu QM-värjäyksellä.

04Tunnisteet

Lähdeviite
SK-MES-1 (Cytionin luettelonumero 300339)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53 negatiivinen
Isoentsyymit
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0132

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
65 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen